羽毛粉發酵可提高消化率和氨基酸的平衡率，改善適口性是很好的水產飼料
引言
我國是肉禽生產和消費大國，2022 年全國家禽總出欄量161.4 億只，較2021 年增長了2.5%。羽毛是家禽的屠宰副產物，占家禽體重的5%-7%，我國每年羽毛產量超過100 萬噸。禽類羽毛屬于角蛋白類，蛋白質達到85%左右，具有極高的飼用潛力。羽毛粉（FeM）是家禽羽毛經過除雜、高溫高壓處理、滅菌和干燥等加工工藝制得的淺黃色、淺灰色的粉狀產品。研究表明，羽毛粉用作飼料原料，對于羽毛資源化利用及緩解魚粉資源供應不足的現狀具有重要意義。
1、羽毛粉的營養價值與物理性質
羽毛粉蛋白質含量在85%以上，由動物難以利用的角蛋白和纖維蛋白組成。氨基酸含量豐富，除Met、Lys、His、Trp4種氨基酸含量較低外，其他氨基酸含量均高于魚粉，表1中比較了羽毛粉和魚粉的營養組成和氨基酸組成。尤其是胱氨酸，在所有飼料原料中含量最高。此外羽毛粉中的維生素B12的含量很高，礦物質元素硫更是高達1.5%，是所有飼料原料中含量最高的[5]。
組成羽毛粉的角蛋白具有致密的三維網狀結構，角蛋白的外周分布大量的疏水性氨基酸，肽鍵及蛋白質骨架的內部包裹少量親水性氨基酸及基團，肽鏈之間形成許多二硫鍵，呈索狀結構，物理化學性質極其穩定，在水、鹽酸及稀鹽酸溶液中完全不溶解，也很難被常見的酪蛋白酶、胰蛋白酶等動物來源的酶降解。因此，要想將羽毛作為飼料原料，必須先用特殊的加工方式對其進行處理。
2、羽毛粉的加工方式及對品質的影響
為了提高羽毛粉的飼用價值，必須通過特殊的加工方式，破壞其中的二硫鍵，形成富含容易消化的可溶性多肽或寡肽，進而提高在動物體內的消化利用率。羽毛粉常用的加工處理方法有高溫高壓水解、酸堿化學水解、擠壓膨化、微生物發酵和酶解法等。
99多功能飼料發酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態飼料發酵劑，更輕易成功、效果更好的生物飼料發酵劑，簡單好用的中草藥發酵劑
2.1高溫高壓水解法
高溫高壓水解法根據主要設備及供熱方式的不同分為兩種：一種是蒸汽高溫高壓水解法，羽毛經過清洗、除塵，裝入水解罐中，利用鍋爐產生的熱蒸汽對水解罐中的物料進行加熱，蒸汽壓力為0.45 MPa，持續時間為60秒，經過烘干、粉碎、化驗，最后包裝為成品；另一種是導熱油高溫高壓水解法，利用導熱油對水解罐中的物料進行加熱，在罐中水解和烘干一次性完成，而后粉碎為成品，加工參數為74 min/30 kPa[6]。
目前該法在小型羽毛粉加工企業中應用較廣泛。高溫高壓的條件徹底破壞了角蛋白空間結構，打破了二硫鍵，使其轉變為可溶性多肽或寡肽。高溫高壓條件下，羽毛降解率可達90%以上[9]。但高溫高壓水解條件會破壞對熱敏感的氨基酸，使蛋氨酸和胱氨酸含量減少，而且工藝流程耗能巨大，對生產設備的安全性能要求很高，同時產生廢氣、廢液污染環境。隨著機械化水平的不斷進步，蒸汽閃爆技術逐漸成為研究熱點，研究證實，經1.6 MPa，1 min 蒸汽閃爆處理，羽毛胃蛋白酶消化率和蛋白質溶解度分別提升到85%和35%。
2.2酸堿化學水解
將一定量的羽毛、一定濃度和體積的酸（或者堿）混合煮沸，并不斷攪拌使羽毛受熱均勻，煮至待處理羽毛既保持原有色澤又可輕輕拉斷。撈出榨取膠液，用清水沖洗酸（或堿）或者用堿（或酸）中和，最后烘干、粉碎過篩即得成品[6]。目前，關于酸或堿溶液的選擇方面， 主要集中在氫氧化鈉（NaOH）、氫氧化鉀（KOH）、氫氧化鈣[Ca(OH)2]、亞硫酸鈉（Na2SO3）、鹽酸（HCl）、硫酸（H2SO4） 和磷酸（H3PO4）等試劑。
強酸、強堿溶液破壞角蛋白中的二硫鍵和肽鍵，從而破壞其空間結構，將其降解為游離氨基酸。此法常用于工業制取胱氨酸，但缺點是強堿對氨基酸破壞嚴重。實際生產中常用鹽酸和硫酸對羽毛進行水解，但該工藝對設備耐腐蝕性要求高，涉及強酸的安全管理，要求嚴格，產物廢水排放量大，干燥成本高。這些缺點限制了該工藝的應用[1]。
2.3酶解法
酶解法主要是采用現代水解酶工程技術，通過多種酶及催化劑分步低溫低壓催化，然后經過規定的高壓高溫水解滅菌，再按照科學整合的加工工藝，經過一系列添加劑的添加，形成優質高效復合型酶解蛋白質原料。酶解羽毛的蛋白酶主要有角蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。采用角蛋白酶酶解羽毛粉，羽毛分解率達到50.5%，酶解液可溶性蛋白含量為225.7 mg/L，胃蛋白酶體外消化率達到23%；先采用高溫和強堿預處理，在此基礎上采用角蛋白酶進行酶解，所得羽毛粉不僅肽含量高，而且約有70%的肽分子質量臆2 000u；采用堿性蛋白酶制備羽毛多肽，最終制得羽毛粉的羽毛多肽含量達到80.68%，可溶性蛋白含量達到92.02%。通過實驗證實，加酶條件下的水解羽毛粉蛋白質降解率比普通水解羽毛粉降解率顯著提高。
用酶解法加工溫度低，生產的羽毛粉熱敏氨基酸基本不會被破壞，效果較好而且穩定，因此在實際生產中應用廣泛。
2.4微生物發酵法
微生物發酵法利用微生物對羽毛進行降解。1988年，研究人員發現馬爪甲團囊菌能分解角蛋白。分解羽毛粉角質蛋白的微生物在自然界普遍存在，主要來自包括細菌、真菌和放線菌在內的30余種微生物，這些微生物可以分泌大量高效降解羽毛的降解酶。篩選出的金黃色節桿菌經過72小時發酵，對羽毛角蛋白的降解率可達75%。篩選出的1株凝結芽孢桿菌對豬毛角蛋白降解率為77.3%。
通過測定蛋白酶活力和羽毛中可溶性蛋白含量評價米曲霉和枯草芽孢桿菌對羽毛的降解效果，結果表明，米曲霉和枯草芽孢桿菌均可對羽毛粉起到降解作用，其中米曲霉的降解效果更為明顯。篩選出可3 天降解羽毛、產可溶性蛋白的菌株貝萊斯芽孢桿菌NLG1，羽毛發酵液上清液中可溶性蛋白含量達到32.76 滋g/mL。
微生物發酵法可以提高羽毛粉的消化率和氨基酸的平衡率，改善其適口性。
3、在水產飼料中的應用
3.1對水產動物生長的影響
目前，關于水解羽毛粉在水產動物中的研究結果表明，適量的羽毛粉可替代魚粉為水產動物提供蛋白，且不會對魚體造成影響。研究表明，羽毛粉替代一定比例的魚粉不會對生長產生影響。研究發現黃顙魚飼料中羽毛粉替代7.5%的魚粉不會對生長造成影響，但是超過7.5%的替代水平則會抑制黃顙魚生長。在研究表明全水解羽毛粉蛋白替代15%-45%魚粉蛋白對生長無顯著影響，而替代比例達到60%時，魚的生長被顯著抑制。水解工藝處理的羽毛粉容易造成氨基酸不平衡，賴氨酸含量較低，則會影響動物生長。在異育銀鯽和大菱鲆中的研究顯示，在添加羽毛粉的飼料中補充晶體賴氨酸和蛋氨酸對水產動物的生長指標有一定改善作用。在黑鯛的研究中發現，飼料中添加5%的酶解羽毛粉或膨化羽毛粉用于替代魚粉，對黑鯛的生長性能無顯著影響，而5%酸解羽毛粉和高溫高壓水解羽毛粉替代黑鯛飼料中的魚粉則顯著降低了黑鯛幼魚的SGR 和FCR 等生長性能指標。筆者認為黑鯛作為肉食性魚類對氨基酸需求較多，酶解羽毛粉與膨化羽毛粉中氨基酸含量充足，而酸解羽毛粉和高溫高壓水解羽毛粉加工過程中對氨基酸的破壞性大，導致適口性、限制性氨基酸含量以及消化率等變差，因此替代魚粉后對黑鯛幼魚的生長性能帶來負面影響。因此，飼料中添加羽毛粉對生長的影響可能與羽毛粉的加工方式、水產動物種類及其生長所需營養條件有關。
3.2對免疫及抗氧化能力的影響
目前，水產養殖集約化程度越來越高，魚類固有的行為、營養、生理等生物學需求受到嚴峻挑戰，極易受到環境因子、飼料、飼養管理等方面的影響發生應激。大量研究證明：在眾多應激中，氧化應激是尤為重要的一種方式。GPX、CAT、SOD是水生生物中3種主要的抗氧化酶。在黑鯛的研究中發現，5%的高溫高壓水解羽毛粉組與酸解羽毛粉組替代魚粉，羽毛粉組的SOD 活性顯著低于對照組，可能是替代魚粉對黑鯛的免疫系統有一定的影響。同時還發現高溫高壓水解羽毛粉組與酸解羽毛粉組轉氨酶活性顯著高于對照組，說明這兩種羽毛粉替代魚粉可能會對肝臟造成一定損傷。在異育銀鯽飼料中添加羽毛粉部分替代10%的魚粉，發現與對照組相比，羽毛粉組的異育銀鯽肝胰臟和腸道抗氧化酶SOD、CAT 和GSH-Px 活力顯著下降，MDA 含量顯著上升。這表明，羽毛粉的直接添加對異育銀鯽造成了一定程度的應激。而添加200-400 mg/kg 的角蛋白酶，對異育銀鯽的抗氧化能力無不良影響。測定腸道血清中抗氧化酶的活性，結果表明45%和60%的全水解羽毛粉蛋白替代魚粉蛋白后，血清、肝臟和中腸組織的消化、免疫和抗氧化指標及組織形態結構受到顯著影響。而發現添加12.5%水解羽毛粉替代76%魚粉飼喂歐洲海鱸幼魚不影響免疫功能。綜上，用羽毛粉產品飼喂水產動物時會因羽毛粉種類、用量等不同而導致免疫及抗氧化能力不同。
3.3對水產動物品質的影響
肉質和體色是評價水產品品質的重要指標之一。影響魚肉品質的因素眾多，包括魚的生長環境、營養獲取量、魚的貯藏方式、魚的健康狀況、魚的屠宰方式等。在研究中，肌肉的硬度、內聚性和咀嚼度隨著全水解羽毛粉蛋白替代魚粉蛋白比例的上升而呈上升趨勢。因此推測全水解羽毛粉蛋白可能會通過影響肌肉細胞的發育來影響肌肉的肉質，但具體的原因還需后續實驗進一步探明。在凡納濱對蝦的研究中發現，2%-8%的水解羽毛粉替代魚粉對凡納濱對蝦肌肉脂肪酸的組成無顯著影響。當水解羽毛粉替代魚粉蛋白添加水平為4%時，凡納濱對蝦肌肉的嫩度、系水性及蒸煮損失均無顯著變化，但添加水平升高到8%時，其肌肉品質顯著下降，嫩度、系水性及蒸煮損失均有顯著變化。當羽毛粉代替魚粉的比例超過25%時，可以提高黃顙魚肌肉硬度、膠黏性，表明水解羽毛粉有助于黃顙魚肌肉品質的提升。水產動物的體色一方面直接受到飼料源中色素物質的影響，另一方面也會間接受到外界環境、飼料營養與機體健康狀況的影響。對黃顙魚來說，黑色素細胞和黃色素細胞及相關色素體在體色形成中的作用最為重要，當羽毛粉替代魚粉水平為5%時，對魚體黑色素合成能力會產生不利影響。隨著HFM 水平的升高，葉黃素含量會出現先下降后上升的趨勢，且在替代水平為5%時，黃顙魚葉黃素含量最低，且與對照組差異顯著。可能是由于當HFM 替代水平為5%時，黃顙魚消化率較低，營養素吸收效率較低，導致飼料葉黃素攝入不足，魚體葉黃素沉積減少。在中華鱉中，飼料中添加酶解羽毛粉可以影響中華鱉的腹部a* 值（紅度），然而對于背部體色無顯著影響。目前關于羽毛粉對體色的相關影響機制還不完全清楚，有待今后做進一步研究。
4、展望
羽毛粉是一種利用價值較高的蛋白質資源，在水產飼料中應用潛力巨大。不同的加工方式對羽毛粉的營養成分和品質影響很大。合理地將各種加工方法有機結合，找到一個更高效、穩定的方式，將成為今后羽毛粉蛋白研究的熱點方向。羽毛粉由于適口性差、氨基酸不平衡等原因對水產動物的生長、抗氧化性能及品質都有一定影響，與其他蛋白源混合或者添加包被晶體氨基酸，可以改善其適口性和氨基酸平衡，從而使羽毛粉廣泛應用于水產飼料中，進一步降低水產動物對魚粉的依賴。
二十余年酶菌結合發酵經驗積累，更輕易成功以高濃度乳酸菌為主的酶菌結合生物飼料發酵劑，簡單好用的中草藥發酵劑，在2022年6月再次升級添加了増香增甜菌種，功能更強效果更好，但運用成本更低。
特別提醒：根據不同物料本品1包可以發酵1-5噸飼料，如果是第一次制作發酵飼料、需要發酵的原料霉變或變質較重、發酵環境溫度較低（低于15℃）、粗纖維較高、需要加快發酵速度或者需要制作出更加香醇高品質的生物發酵飼料出來等情況，請按照本產品說明書使用量增加2-3倍的使用量即可。
（南寧微瑞生物科技有限公司是廣西助農畜牧科技有限公司的直屬下屬公司）
【產品特點】
1.本產品采用以高濃度乳酸菌（300億/g）為主要原料，結合了復合益生菌、酶制劑、酸化劑的諸多優點，能夠發酵處理各種飼料原料、青綠飼料、秸稈粗飼料、各類食品加工下腳料糟渣等成為營養豐富的飼料，且能夠降解飼料中的抗營養因子，提高飼料在動物腸道中的消化吸收利用率，是降低飼料成本、改善動物肉品質、改善養殖場環境（臭味氨氣下降非常明顯）的好方案，使用后養殖環境形成益生菌環境，對動物健康有較好的保健作用。
2.對霉變飼料及飼料原料具有脫霉作用，霉菌在厭氧發酵環境中無法生存，達到脫霉效果；對棉菜粕具有脫毒作用，通過酶制劑對抗營養因子的分解，并在發酵的過程中產生小肽。
3.產品中另外添加了新型增甜增香菌種，明顯改善發酵料的適口性，使得處理后的發酵料增香增甜，動物對發酵料更愛吃。
4.客戶鑒別本產品真假和一些發酵劑產品比較效果的簡單方法：500~600毫升的空塑料瓶裝入50克大米，倒入300毫升不超過40℃的干凈溫水，加入本品2-5克，蓋上蓋子搖動一下后放在溫度30℃左右環境中每天幾次小心放氣，2～3天大米基本溶解成乳狀。假冒發酵劑幾乎不能溶解大米（也就是分解效果差），無大氣體產生、發酵速度慢和香甜度差等，效果對比一目了然。
【產品使用方法】
一、制作液體菌液（保健菌液與加強型EM菌液）
將本品1包和200克紅糖溶于20公斤的溫水中（不高于45℃）密封發酵72小時以上（注意放氣安全），就成為酶菌結合的益生保健菌液（加強型EM菌）要求長期密封保存一年以上有效，長期在畜禽水產養殖動物上按照飼料重量的0.3%-0.5%拌入飼料中飼喂，飲水按照0.2%添加，動物會非常喜吃，動物各階段（包括孕畜）均可長期使用。也可以用液體菌液制作青貯飼料，每噸青貯飼料中加入液體菌液1-2公斤即可。
二、處理全價或自配飼料成無抗飼料
本品1包（500克）與全價顆粒飼料1000公斤（可以加入中草藥20公斤效果更好），清水600公斤，混勻后放入陶瓷或者塑料桶中嚴格密封，3天后開始使用。使用時發酵的全價飼料10%-20%，未發酵的全價飼料80%-90%，周圍疫情高發期發酵的全價飼料增加到20%-30%，使用后具有明顯的保健效果與提高消化降低料耗的作用。
→長期在豬飼料中添加部分發酵全價飼料對比效果明顯；→長期飼喂部分發酵全價飼料對豬生長、糞便臭味物質、血清抗氧化及免疫性能指標的影響
三、發酵木薯渣、豆渣、米粉面條加工下腳料、工廠學校剩飯、米糠、統糠、菌糠、酒糟、果渣果皮、青秸稈、牧草、紅薯藤等原料
本品0.5-1包與1噸待發酵原料（部分原料需要粉碎），含淀粉類的飼料100公斤（比例約為原料的5%以上，如玉米、大米、紅薯、淀粉均可，也可以用3公斤以上多糖性復合菌種營養基代替）、食鹽2公斤（含有足量食鹽的原料則不添加，食鹽不能放在激活的菌種中，要直接撒在發酵料上或需要添加的清水中，下同）。含水量調節到55%-60%左右，壓實密封發酵7天左右有濃郁香味時即可使用。發酵后的料適口性、營養、消化率較未發酵前有明顯提升。發酵后的飼料根據不同動物與不同飼養周期按照10%-50%與該動物其他全價飼料混合后飼喂，不可以單獨飼喂或全部飼喂發酵飼料。
四、霉變的飼料及飼料原料脫霉
每1噸霉變飼料或飼料原料添加本品1-2包、玉米粉400公斤（霉變原料中含有能量飼料如玉米粉、小麥粉等20%以上可無需另外添加玉米粉，也可以用5公斤以上多糖性復合菌種營養基代替），均勻混合后將物料含水量調節至60%左右，密封發酵7-15天后（夏短冬長，氣溫低于15度時建議在室內進行保溫發酵）,發酵料有濃郁甜酒香味即可使用。脫霉后的飼料按照飼料比例的30%左右與飼養動物的全價飼料混合后飼喂，不可以單獨飼喂。
五、對棉粕、菜粕、菜粕、棕櫚粕、花生枯、茶枯的脫毒與生成小肽
本品0.5-1包、1噸待發酵原料、玉米粉100公斤（也可以用3公斤以上多糖性復合菌種營養基代替）、食鹽2公斤。含水量調節到55%左右密封發酵一周以上。本產品不僅能夠快速去除棉粕、菜粕、菜粕、棕櫚粕等其中的抗營養因子（俗稱其中的毒素），形成生物蛋白飼料代替豆粕提高消化吸收率，還能夠在發酵過程中生成大量對動物有益的的小肽。
六、中草藥及中藥渣發酵方法
1.固態中草藥發酵技術：將100公斤中草藥粉碎，越細越好放入80公斤的35℃左右的溫水中，加入玉米粉與豆粕各10公斤、本品1包、食鹽200克，放入塑料容器內壓實密封發酵7天以上后使用，密封可以保存一年以上，按照飼料比例的1%以上添加到飼料或飲水中使用。
2.液態中草藥發酵技術（即發酵成為中草藥活菌水的方法）：1-2公斤中草藥（如“御瘟湯”）+1包本品+10公斤全價飼料（可以用750克以上多糖性復合菌種營養基或2公斤以上紅糖代替）+100公斤清水混合在非金屬容器中簡單密封發酵72小時以上后使用（在半個月內使用完效果更好，且要持續密封保存，否則時間一長可能變質不能使用）。按照5%-10%的比例添加到動物飼料中飼喂，或2%-5%的比例添加的動物飲水中飼喂。
3.中藥渣發酵：中藥渣1立方，本品1包、玉米粉100公斤（也可以用3公斤以上多糖性復合菌種營養基代替）、豆粕50公斤（花生粕、菜粕、茶粕等均可），食鹽3公斤，混合含水量調節在55%-60%左右，裝入大容器或薄膜袋中壓實密封發酵，一般一周左右有濃郁的甜酒香味即可使用，密封可以保存一年以上。發酵后的中藥渣按5%以上的比例添加到飼料中。
非洲豬瘟防控期間運用這個方法更好——豬場復養增加自制發酵中草藥體內外運用能夠輕易成功，實施容易成本低，幾乎不會失敗
七、制作輕度全量發酵飼料及水料上的運用
本品0.5-1包、全價飼料1000公斤、清水600-800公斤混合發酵6-24小時后飼喂，形成輕度全量發酵預消化模式；或者清水增加到1500公斤以上形成水料發酵24小時內飼喂，兩種模式能夠達到更好的消化吸收率。
八、制作優質的青貯飼料
每噸青貯飼料中加入液體菌液2公斤即可，能夠加速發酵、提高質量和適口性，且不容易失敗還能夠更長時間保存。
【配料說明和注意事項】
1、將本品放入約20倍的溫水中化開2-24小時活化后再使用效果更好；在發酵物料時一定要壓實密封，環境溫度低于20℃建議適當保溫或延長發酵時間；制作液體菌劑和密封發酵飼料過程中會產生氣體注意放氣安全；密封好不開封的情況下發酵料可以保存1年以上不變質。密封效果不好會導致發酵料表面霉變，飼喂時要鏟除表面霉變的發酵料。
2、發酵料如果酸度過大，動物適口性差時可以在飼喂前混料時添加1%-2%小蘇打中和酸度，改善動物適口性，或者降低發酵飼料的使用量。
3、發酵料開封進行飼喂后，建議7天內使用完，每次取料后要注意繼續進行密封保存。
4、發酵料由于營養不全面，建議在飼喂混料時添加適當的能量飼料和蛋白飼料、預混料來調節營養配比，使動物達到更佳的飼喂效果和生長速度。
5、動物第一次飼喂發酵料必須遵循先少量飼喂然后逐步加量的原則，一般幼小階段動物最大添加量10%-20%，中等階段動物20%-30%，鄰近出欄階段30%-40%。在實際飼養中行適當的調整。
6、第一次使用發酵飼料可能會出現零星或者短時間的腹瀉，這些都屬于正常的現象。可以通過減少發酵料和添加藥物進行調整。連續使用發酵料一周后會發現動物的消化率大大的提高，糞便變松軟而且量變少，欄舍的氨臭味大大的減低。
7、飼喂本產品及發酵飼料不影響正常的動物免疫，動物發生疾病使用大劑量抗生素藥物時，繼續使用本品和發酵飼料無副作用，母畜與孕畜也可以使用。
【包裝規格】500克/包，30包/箱。規模養殖場可以提供25公斤裝或者進行產品定制。
【質保與儲存】12個月，常溫下于通風、陰涼、干燥處存放。
相關鏈接：99多功能飼料發酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態飼料發酵劑，更輕易成功、效果更好的生物飼料發酵劑，簡單好用的中草藥發酵劑
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