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導讀

    生物發酵飼料作為實現無抗飼養的關鍵技術之一，近年來在我國養殖行業和飼料工業得到了迅速發展。為研究發酵全價飼料（FCF）在生長豬上的應用效果，作者前期開展了為期１個月（短期）的發酵全價飼料應用試驗，結果表明，短期內100％飼喂發酵全價飼料可以提高生長豬的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和飼料轉化率，降低死淘率及糞便臭味物質含量，具有很好的抗生素替代效果。但是長期100％飼喂是否仍具有顯著優勢，是否會產生健康風險，尚未可知。目前關于發酵全價飼料的研究多采用部分添加的飼喂模式，喬艷明等用發酵飼料替代5％的育肥豬日糧，試驗期16周，結果表明豬的生產性能提高，發病率降低；何如芳在斷奶仔豬日糧中添加30％的發酵全價飼料，飼喂28ｄ，結果表明發酵全價飼料可以提高斷奶仔豬的生產性能，改善腸道健康，提高斷奶仔豬的抗病力；胡新旭等研究表明，日糧中含有20％的固態發酵全價飼料（試驗期154ｄ）可提高生長育肥豬的生產性能，增強免疫力，改善肉品質，實現無抗飼養。而關于生長豬長期100％飼喂發酵全價飼料的研究鮮見報道。本研究在前期試驗基礎上，延長試驗周期，通過對生長豬生長性能、糞便臭味物質、血清抗氧化性能及免疫性能指標的測定，揭示長期100％飼喂發酵全價飼料對生長豬健康的影響，為發酵全價飼料的科學應用提供參考。

１.１ 試驗動物及分組

    試驗在重慶市榮昌區重慶市畜牧科學院動物試驗豬場進行。選擇90頭22ｋｇ左右的健康二元雜交豬（約克夏×榮昌豬），公母各半，隨機分成３組，每組6個重復，每個重復5頭豬，進行7ｄ預飼，隨后對照組飼喂無抗基礎日糧，抗生素組飼喂含0.04％桿菌肽鋅（有效含量為10％）的基礎日糧，發酵組飼喂經發酵處理后的基礎日糧，試驗期60ｄ。試驗期間，豬自由采食和飲水，按豬場常規程序消毒免疫。

１.２ 日糧組成及養分含量

   基礎日糧的配制參照《中國豬飼養標準2004》肉脂型生長豬營養需要量。各組日糧原料組成及日糧營養水平見表１。發酵飼料制作方法及飼料發酵前后養分含量的測定均參照劉志云等方法。

１.３ 樣品采集與指標測定

     試驗期間，每天記錄豬的采食量。試驗結束時空腹稱重，記錄豬末重，計算ADG、ADFI及料重比（F／G）；采集豬新鮮排泄的糞便樣品，分裝于50ｍＬ離心管，置于冰盒中，運回實驗室后測定吲哚、3－甲基吲哚、對甲酚及揮發性脂肪酸（VFA）的含量；試驗結束當天上午08∶00，每組選取6頭豬，頸靜脈采血8～10ｍＬ，分裝于促凝管中，4℃、3000ｒ／min離心10min，分離血清，用于測定血清抗氧化指標和免疫指標。飼料發酵前后還原力、羥自由基清除力、DPPH自由基清除率的測定參考Yang等方法；總抗氧化力的測定采用FRAP法；糞便中對甲酚、吲哚、3-甲基吲哚含量的測定參考宋凡方法；VFA的測定參照龍黎明等方法；血清總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）采用分光光度法進行測定，血清免疫球蛋白Ｇ（IgG）、免疫球蛋白Ｍ（IgM）、補體３（C3）、補體４（C4）使用ELISA法測定，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

１.４ 數據處理

    數據以平均值±標準差表示。采用SPSS 19.0對飼料的抗氧化性能進行獨立樣本ｔ檢驗，對豬生長性能、血清抗氧化指標、免疫指標和糞便臭味物質進行單因素方差分析，組間差異使用Duncan氏多重比較進行顯著性檢驗，以Ｐ＜0.05作為差異顯著性判斷標準。

２.１ 發酵前后全價飼料氧化還原特性的變化

     由表２可知，飼料經發酵處理后，總抗氧化能力極顯著提高（Ｐ＜０.０１），還原力和羥自由基清除力有升高趨勢，但差異不顯著（Ｐ＞0.05），DPPH 自由基清除率無顯著變化（Ｐ＞0.05）。

３.１ 發酵全價飼料對生長豬生長性能和糞便臭味物質的影響

     作者前期研究結果表明，飼喂1個月發酵全價飼料可以明顯提高生長豬ADFI、ADG，降低生長豬F／G和死淘率，降低糞便臭味物質含量，具有很好的抗生素替代效果。本研究在前期飼喂30ｄ的基礎上又持續進行了１個月的飼喂試驗，結果顯示，在試驗結束時，發酵組豬第１個月所表現出的促生長、降低糞便臭味物質、替代抗生素方面的優勢都消失了。

    發酵全價飼料在生長豬上的長期效應消失，分析其原因，一方面是由于試驗所用的發酵飼料有機酸含量較高，pH在４.０～４.５之間，其中乳酸含量為421.67mmol／ｋｇ，長期飼喂對消化系統已發育完善的生長豬可能存在健康風險。Missotten等、Brooks報道指出，發酵飼料中乳酸等有機酸含量過多，長期飼喂會引起豬生長受阻與胃腸道疾病（腸壁變薄、易斷等，進而引起胃潰瘍、胃扭轉等）。作者在本試驗完成后持續觀察，發現發酵組個別豬出現吐血現象，解剖發現豬胃部出現潰瘍，腸道組織切片顯示，豬十二指腸、空腸、結腸黏膜完整性受損，絨毛排列疏松無序，表明長期100０％飼喂發酵全價飼料確實引起了豬胃腸道結構性損傷，影響營養物質的消化代謝，進而引起動物生長受阻和糞便物質改變。另一方面，長期飼喂含高劑量活性益生菌的飼料，可能引發豬腸道菌群結構變化，包括菌群多樣性降低、菌群的過度增長等，進而引起乳酸中毒、膽鹽吸收障礙等代謝紊亂問題。Ｈｅ等研究表明，斷奶仔豬（試驗周期25ｄ）自由采食枯草芽孢桿菌發酵飼料會改變其腸道菌群結構，擾亂乳酸、乳清酸和非結合性膽汁酸的正常產生，提高循環系統中白介素－６的水平，增加腹瀉發生率。本研究所用發酵全價飼料中乳酸菌活性為9.67lg CFU/ｇ，連續飼喂２個月，可能會引起豬腸道菌群結構失衡。但本研究未對豬腸道菌群結構多樣性及菌群代謝產物進行分析，因此暫不能判定其是否為長期效應消失的因素之一，后續研究中將會進一步探索。

    另外，發酵全價飼料在儲存和飼喂的過程中還存在沉降問題。Missotten等研究表明，發酵液態飼料存在較為嚴重的固體顆粒物沉降問題，未經有效控制，會使仔豬生長受阻，同時伴隨腸道形態結構損傷。本試驗所用的固態發酵飼料的水分含量約為50％，存放過程中也存在礦物質及固態顆粒物的沉降問題，推測是豬生長受阻、糞便物質變化的另一可能因素。

３.２ 發酵全價飼料對生長豬血清抗氧化和免疫性能指標的影響

    Gilbert等研究表明，微生物降解作用產生的小肽類物質可以提高飼料的抗氧化功能。王雨瓊等認為飼料的抗氧化性能在一定程度上反映出發酵飼料的品質。Sharma等研究發現，飼料中的抗氧化物質可以維持動物機體的抗氧化防御機制，抵御自由基產生的氧化損傷，對動物的健康和免疫系統至關重要。本試驗結果也說明固態發酵技術在提高飼料氧化還原性能方面具有積極作用，經檢測，飼料發酵后的總抗氧化能力極顯著提高，還原力和羥自由基清除力有升高趨勢。然而，這種積極作用并未在長期飼喂后體現在動物的血清抗氧化指標上。

    本試驗中，飼喂發酵全價飼料的豬血清免疫指標IgM和C4水平有所提高，這與前人的研究結果相符。Wang等報道發酵飼料中的益生菌代謝產物（如有機酸、酶、SCFAs、神經傳導物質等）在動物機體免疫調節中發揮重要作用。何如芳對斷奶仔豬飼喂30％的發酵飼料（試驗期28ｄ）發現，仔豬血清總蛋白和IgM水平提高。Sanchez等認為飼喂活性益生菌能夠影響動物機體免疫系統，調節免疫反應。