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1.1 復合菌培養物

根據本課題組前期研究成果，選用麩皮、玉米、米糠、棗渣、玉米皮及豆粕等為主要原料，將活化好的釀酒酵母菌 XＲ4、釀酒酵母菌 BC、枯草芽孢桿菌 A15 和乳酸菌按2∶2∶1∶1 比例混合，以 15%接種量接入固態發酵料中，加水使最終含水量為45%，于發酵車間固態堆積發酵48h制備復合菌培養物。復合菌培養物中含有 β － 葡聚糖、甘露聚糖、多肽、氨基酸和有機酸 5 種主效活性物質，其含量分別為 ≥ 1450 mg /kg、≥ 670 mg /kg、≥1.3 mg /g、≥152.7 mg /kg 和≥1.48 mg /g。

1.2 基礎飼糧

母豬從妊娠第 85 天開始飼喂哺乳料，基礎飼糧參照 NＲC(2012)標準進行配制，飼糧組成及營養水平見表 1。

1.3 試驗動物與試驗設計

試驗于 2018 年 5—6 月在河北省張家口市某豬場進行，試驗期從母豬臨產前 20 天至哺乳仔豬斷奶即母豬產后20天結束，共40d。選擇同一批次、胎次和體重相近的加系母豬40頭，隨機分為對照組和試驗組，每組設 4 個重復，每個重復5頭豬。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組在基礎飼糧中添加 10%復合菌培養物。

妊娠后期母豬飼養于妊娠舍內，預產期前 7天轉至徹底消毒的分娩舍，妊娠后期，每日05:30和16:00 飼喂，根據體況每日飼喂 3 kg 左右;分娩前 3 天，每頭母豬的日飼喂量分別為 1.5、1.0 和0.5 kg;分娩 當 天 不 飼 喂; 泌 乳 期 每 日 05: 30、10:00和 16:00 飼喂，分娩后第1 天飼喂 1.0 kg;第2 天后，在 1.0 kg 的基礎上每日增加 0.7 kg;第 5～6 天時，增加至 4.5 kg 左右;之后開始自由采食(自由采食程度判斷標準為吃飽后料槽中略有余料為準)。哺乳仔豬由母乳喂養，不添加代乳料。母豬和仔豬均自由飲水，免疫、消毒、衛生等常規程序按試驗豬場相關制度進行。所有試驗豬均飼養于同一棟豬舍內，并保證向陽面與背陽面每組欄數相等，盡可能控制環境因素一致。

1.4 血樣采集

分別于母豬分娩 24 h 內和斷奶(產后 20 天) 第 2 天晨飼前，每個重復隨機選 3 頭母豬，耳靜脈采血 10 mL，置于采血管中，常溫靜置 30 min 后，3 000 r/min離 心 20 min，取上層血清分裝于1.5 mL離心管中，編號并記錄，－20 ℃保存待測。

1.5 測定指標與方法

1.5.1 母豬繁殖性能

記錄每頭母豬產活仔數、產健仔數、產弱仔數和死胎數，測定母豬窩均產活仔數、窩均產健仔數、窩均產弱仔數和窩均死胎數。健仔:體重＞0.8 kg，沒有畸形的仔豬;弱仔:體重＜0.8 kg 的仔豬。

1.5.2 哺乳仔豬生長性能

記錄各仔豬出生后和 20 日齡體重(以早晨空腹稱重為準)。計算哺乳仔豬初生平均個體重、20日齡斷奶平均個體重、初生平均窩重、20 日齡斷奶平均窩重。

1.5.3 母豬泌乳期采食情況

1.5.4 母豬便秘情況

通過觀察糞便顏色(黃色/黑色)、干濕度(干/濕)、氣味(惡臭/正常臭味)、形狀(是否結粒、結粒大小)、硬度及是否有黏液附著，記錄母豬產前 7天、產后 7 天便秘情況。

1.5.5 血清生化指標

測定指標包括:總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)含量以及堿性磷酸酶(ALP)、谷草轉氨酶(AST)活性。以上指標測試試劑盒均購自于南京建成生物工程研究所，測定方法按照試劑盒操作說明書進行。

1.5.6 免疫功能及抗氧化能力

測定指標包括:免疫球蛋白 M(IgM)、免疫球蛋白 G(IgG)、白細胞介素 －2(IL-2)、白細胞介素 －6(IL-6)、腫瘤壞死因子 － α(TNF-α)含量及總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量與總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)活性。以上指標測試試劑盒均購自于南京建成生物工程研究所，測定方法按照試劑盒操作說明書進行。

1.6 統計分析

采用 SAS 9.0 對試驗數據進行單因素方差分析，用 t 檢驗進行組間比較，試驗結果用平均值±標準誤表示，P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。

2結 果 與 分 析

2.1 復合菌培養物對母豬繁殖性能的影響

復合菌培養物對母豬繁殖性能的影響見表 2。與對照組相比，試驗組窩均死胎數減少0.75 頭(P＜0.01)，降低了45.45%;2 個組窩均產活仔數、窩均產健仔數和窩均產弱仔數均無顯著差異(P＞0.05)，但試驗組有改善的趨勢，其中窩均產活仔數、窩均產健仔數分別增加了1.90%和 8.55%，窩均產弱仔降低了 15.25%。總體來看，復合菌培養物在降低母豬窩均死胎數上具有顯著的效果。

3.1 復合菌培養物對母豬繁殖性能的影響

胚胎死亡是影響母豬繁殖性能的重要因素之一，因此，降低母豬的死胎數對提高母豬的繁殖性能至關重要。研究表明益生菌發酵飼料部分替代普通飼料飼喂母豬后，其產仔數和產仔成活數顯著高于對照組，仔豬的初生重顯著提高。

本課題組研制的復合菌培養物是一種含有 4株益生菌和多種營養活性物質的混合發酵產物。首先，該培養物能夠使消化道內的乳酸菌、酵母菌等有益菌數量增加，促進妊娠母豬腸道微生態平衡，抑制大腸桿菌等致病菌生長，達到防御疾病的功效;其次，培養物中的 β － 葡聚糖和甘露聚糖能增強動物機體的免疫力;最后，培養物中的多肽、有機酸和氨基酸能促進動物對營養物質的吸收。益生菌和營養活性物質共同作用于機體，參與機體生理活動和代謝調節，不僅能改善動物健康狀態，還能促進動物生長、增強機體免疫能力，從而降低了母豬窩均死胎數，提高了母豬的繁殖性能。

3.2 復合菌培養物對哺乳仔豬生長性能的影響

在母豬妊娠后期和泌乳期飼糧中添加復合菌培養物后，顯著提高了哺乳仔豬斷奶平均重，其主要的原因可能是培養物提高了母乳質量、泌乳量和仔豬自身腸道的吸收情況。有研究顯示，母乳質量好的豬其仔豬斷奶體重大，生長速度快，免疫能力強;哺乳母豬母乳中的生物活性物質如谷氨酰胺、表皮生長因子、轉化生長因子等對仔豬腸道的發育和功能的成熟有促進作用。

復合菌培養物中大量的益生菌及其代謝產物，如氨基酸、維生素、活性肽、有機酸和消化酶等，這些活性物質能促進腸道對養分的消化吸收，益生菌可調節腸道微生態區系、促進腸道健康發育;同時母乳中還含有免疫球蛋白和各種免疫調節因子;仔豬通過母乳而獲得了相應的受益，其抗病能力以及對營養的吸收率都得到了明顯的提高。

3.3 復合菌培養物對母豬采食量、便秘的影響

哺乳母豬采食量高低限制著母豬生產性能的發揮，也是決定仔豬斷奶體重及其健康狀況的關鍵因素。諸多研究都表明飼喂發酵飼料能提高仔豬、生長育肥豬、泌乳母豬的平均日采食量。在規模化養殖場中，母豬在妊娠后期和哺乳前期發生便秘的現象十分普遍。母豬便秘可能會導致難產、死胎，引發子宮炎、乳房炎等，出現產后泌乳障礙等諸多問題。研究表明，在母豬飼糧中添加發酵飼料、濕態發酵豆粕，可以不同程度改善母豬的便秘情況。

復合菌培養物主要通過釀酒酵母菌、乳酸菌、枯草芽孢桿菌等混合發酵而成，發酵過程會產生獨特的酸香氣味，能夠刺激母豬食欲，增加采食量;同時有益菌產生的各種消化酶、有機酸等，能降解飼料原料中的抗營養因子，軟化纖維硬度，改善了飼料的適口性及利用率，促進了母豬采食。發酵后產生的營養活性物質代謝酶和有機酸等可調節腸道微生物，使母豬胃腸道微生物區系、腸道內環境得到改善，促進腸道運動和增加食糜流通性，減少了母豬便秘的發生。

3.4 復合菌培養物對母豬血清生化指標的影響

血清 UN 是蛋白質分解的最終產物，其含量可以準確地反映動物機體內蛋白質代謝和氨基酸之間的平衡狀況。血清中的 ALP 主要來自肝臟和骨骼等組織，與體內鋅和磷的代謝關系十分密切。本試驗中，試驗組母豬血清 UN 含量降低，血清ALP 活性升高，可能是由于復合菌培養物中含有豐富的氨基酸、多肽和消化酶，利于氨基酸的吸收，提高了蛋白質的沉積率，而多肽能促進礦物元素的被動轉運及在體內的儲存，消化酶可以將飼料中的營養物質分解成更利于動物吸收的小分子物質，因此提高了飼料利用率。

TC 是動物體必需的營養成分，是血液中脂蛋白總的含量，反映機體脂肪代謝情況。妊娠母體的血脂含量在一定范圍內升高對母體和胎兒是有益的，但血脂含量過高使脂代謝異常，會導致胎盤早剝及妊娠高血壓綜合征的發生。已有研究顯示發酵飼料對血清中 TC 的含量沒有顯著影響或含量顯著降低，但本試驗研究結果表明試驗組母豬分娩時 TC 含量顯著高于對照組，可能是由于培養物中的活性物質加強了妊娠后期母體的脂肪代謝，母體血液中游離脂肪酸和甘油含量增加，游離的脂肪酸需要運輸到指定的位置才能發揮作用，而脂肪酸的運輸需要大量的膽固醇。血液中游離脂肪酸可以作為母體合成葡萄糖的優先有效物質，并作為能量進行儲存以保證妊娠后期胎兒所需的營養，同時，有利于乳脂合成。

3.5 復合菌培養物對母豬免疫功能及抗氧化能力的影響

血清中抗體的升高可在一定程度上反映機體免疫功能增強。T-AOC 是反映整個機體總的抗氧化能力的指標，其高低決定了機體清除自由基的能力。GSH-Px、T-SOD 和 CAT 是機體最主要的酶促抗氧化系統，其主要作用是清除自由基和活性氧、防止脂質過氧化物生產。余淼等、王娟娟等研究均表明，微生物發酵飼料可提高動物血清中抗體含量，增強機體免疫功能，具有抗氧化活性，提高抗氧化能力。

當復合菌培養物中的有益微生物進入動物腸道后，可以建立胃腸內微生態平衡，抑制病原微生物的生長，促進有益微生物的繁殖，從而提高機體免疫功能。同時，培養物中的營養活性物質 β － 葡聚糖在消化道中不可溶、不吸收、不產生黏性，作為一種免疫促進劑，能夠增強機體的非特異性免疫能力，改善動物消化道的菌群結構;甘露聚糖是一種免疫功能較強的細胞壁多糖，不僅能增加動物免疫能力，還能吸附外源性毒素和病原菌，在保持腸道微生態的平衡方面起重要作用。因此，在益生菌和營養活性物質的共同作用下，母豬的免疫功能得以提高。

另外，復合菌在發酵過程中產生氨基酸、乳酸、類胡蘿卜素、維生素 C、維生素 E 以及多酚類等多種抗氧化活性物質，通過采食進入母豬體內，提高了機體的抗氧化能力;培養物中含有包括乳酸菌在內的多種益生菌，研究證明乳酸菌具有抗氧化活性，其抗氧化物質主要包括抗氧化酶、錳離子和巰基化合物等。

4結 論