1.1 試驗材料

試驗所用生物發酵飼料由武漢楚天艾科生物科技集團有限公司提供。生物發酵飼料使用小麥、玉米、黃豆等作為原料，經過植物乳桿菌和釀酒酵母等發酵活菌成分的分解代謝作用，采取相應的加工工藝生產而成，其營養水平（質量分數）如下：粗蛋白質27.96%、粗脂肪3.1%、粗灰分14.71%。對照組飼料為商用品牌的小龍蝦專用硬顆粒飼料，其營養水平為：粗蛋白質24.38%、粗脂肪11.33%、粗灰分7.46%。試驗所用小龍蝦初始體質量為（6.64±1.24）g，購自當地小龍蝦繁殖場，挑選規格一致、色澤清亮、無疾病癥狀的個體進行試驗。

1.2 試驗條件與方法

養殖試驗池塘位于湖北省江陵縣三湖農場，選擇池塘10口，生態條件基本一致，單口池塘面積約0.8hm2，按照小龍蝦池塘養殖技術規程進行相應的生態條件改造，投苗前種植沉水性植物，其中以輪葉黑藻為主，面積約占池塘底部的1/2。試驗組與對照組各隨機選取5口池塘。試驗小龍蝦幼苗投放密度為25kg/667m2，投放3d后，開始投喂飼料，每天投喂2次（9：00，17：00），以下午為主，在養殖過程中根據小龍蝦的生長和攝食情況做相應的調整。定期檢測水體的水質指標，如氨氮、亞硝酸鹽、溶解氧、pH值及硫化氫等。試驗期為60d。

1.3 樣品采集與分析測定

1.3.1 樣品采集養殖試驗結束后，對試驗組和對照組隨機進行取樣，精確稱量蝦的體質量。稱量完成后，每口池塘隨機選取20尾蝦，用1mL經肝素鈉抗凝處理的醫用注射器抽取血淋巴，將血淋巴置于2mL無菌EP中，4℃靜置過夜后，于4℃，5000r/min離心15min，取上清液置于-80℃保存備用。然后，迅速將蝦解剖，取出肝胰腺，放入無菌EP中液氮速凍后-80℃保存用于生化指標的測定。最后，取出整個腹部肌肉，稱重后置于-80℃保存。

1.3.2 生長性能指標測定

WGR（%）=（mt-m0）/m0×100

SGR（%/d）=（lnmt-lnm0）/t×100

式中：mt為終末平均體質量（g）、m0為初始平均體質量（g）、t為飼養時間（d）。

1.3.3 肌肉品質指標測定

pH值的測定：分別于解剖后45min和24h檢測胸肌和腿肌的pH值，分別記為pH1和pH2。將pH計的探針插入肌肉中，測定3個不同位置，取平均值；含肉率（%）=（蝦腹部肌肉質量/蝦體質量）×100；滴水損失：將修整好的肉樣，稱重記為Mdl1，裝入專用塑料袋中，在4℃冰箱放置24h后，用定性濾紙輕拭去肉樣表層汁液，稱重記為Mdl2；滴水損失（%）=（Mdl1－Mdl2）/Mdl1×100；稱取整個腹部肌肉樣品，記下其重量Mcl1，放入蒸煮袋中在85℃水浴鍋中蒸煮20min。蒸煮后冷卻至室溫，用吸水紙吸干水分，然后再次稱重量Mcl2；蒸煮損失（%）=（Mcl1-Mcl2）/Mcl1×100。

1.3.4 血清非特異性免疫指標測定

血清中總蛋白（TP）、溶菌酶（LZM）、堿性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）采用南京建成生物工程有限公司試劑盒檢測。

1.3.5 肝胰腺抗氧化指標測定

稱取0.1g解凍的樣品，加入0.9mL預冷的緩沖液，在冰浴條件下進行勻漿，然后于4℃、3000r/min離心10min，取上清液即為粗酶液，立即進行超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和丙二醛（MDA）指標的測定。肝胰腺抗氧化指標使用商業試劑盒（南京建成生物工程有限公司生產），按照說明要求操作。

1.4 數據統計與分析

所有結果均使用“平均數±標準差”表示，使用Excel和SPSS軟件對結果進行統計與分析，發酵飼料組合對照組間數據差異使用單因素方差分析，采用Duncan's檢驗法進行多重比較，P<0.05表示差異顯著。

2結果與分析

生物發酵飼料是經過益生菌發酵處理工藝后生產的含發酵豆粕和各種有益微生物等成分的新型飼料。經過發酵后，飼料中的抗營養因子減少，飼料的部分大分子成分轉化成更易被動物消化吸收的小肽、氨基酸等，增加了飼料的營養價值，從而促進養殖動物生長。在本試驗中，與對照組相比，生物發酵飼料組克氏原螯蝦的末體重、增重率和特定生長率顯著增加（P<0.05）。試驗結果表明，生物發酵飼料對克氏原螯蝦的生長發育有明顯的促進作用，這與鐘小群等研究鯉魚，Refstie等研究大西洋鮭的結果相似。

3.2 生物發酵飼料對克氏原螯蝦肌肉品質的影響

肌肉品質由多種指標共同決定，包括pH值、滴水損失率和質構特性等。含肉率是評價魚蝦等水產品的品質、經濟性狀和生產性能的重要指標。蒸煮損失是衡量肌肉蛋白質在加熱過程中變性凝固所失水分的重要指標。朱坤等通過飼養試驗發現，發酵飼料顯著降低育肥豬肌肉蒸煮剪切力而提高嫩度。在本試驗中，生物發酵飼料對克氏原螯蝦肌肉的含肉率和蒸煮損失有顯著性影響，而對pH值和滴水損失率無顯著影響。這說明與投喂普通飼料相比，生物發酵飼料促進了肌肉的生長，增強了肌肉的保水性能，對肌肉品質產生一定的影響。本研究結果與鐘小群等研究鯉魚、周興華等研究鯽魚等得出的發酵飼料對魚體品質未產生顯著影響的結論不同，一方面可能是品種差異不同引起，另一方面可能是添加量不同所造成的。

3.3 生物發酵飼料對克氏原螯蝦免疫機能的影響

對于甲殼動物而言，免疫系統不完善，免疫應答較為原始，依靠非特異性免疫來抵抗病原微生物和其他有害物質，因而可以將非特異性免疫相關的酶活性作為評價其免疫狀態的重要指標。

LZM是血液中殺菌的重要物質，在防御病原入侵發揮重要作用。AKP是甲殼動物生物體內重要的代謝調節酶，在蝦蟹營養物質的吸收和利用中起著重要作用，可提高蝦蟹的抗病性。ACP是重要的多功能磷酸單酯水解酶，在維持動物生理機能與免疫中發揮關鍵作用。氧自由基在先天免疫防御系統中起關鍵作用，然而過多的自由基可引起氧化應激，導致脂質過氧化，細胞和組織損傷，機體的免疫能力顯著下降。丙二醛（MDA）是脂質過氧化的終產物，被普遍認為是氧化損傷的指示指標。同時，機體具有一套防御體系，會消除過量的氧自由基，其中SOD和CAT發揮主要的作用。

夏青等研究表明，以生物飼料作為凡納濱對蝦飼料時，蝦體抗氧化指標明顯提高。黃世金等發現飼料中添加發酵豆粕后羅非魚的SOD、LZM和AKP活性顯著提高。

在本試驗中，與對照組相比，生物發酵飼料組血清中的LZM、AKP、ACP活性和肝胰腺中的SOD和CAT活性均顯著上升（P＜0.05），而肝胰腺中的MDA活性顯著下降（P＜0.05）。

本試驗結果表明，生物發酵飼料提高了克氏原螯蝦非特異性免疫力和抗氧化能力，減少了細胞損傷。究其原因，可能是生物發酵飼料含有的氨基酸、消化酶、核苷酸和益生菌等成分，能夠增強動物機體免疫機能，促進動物健康生長。

4結 論