植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌混菌發酵飼料對肉雞生長性能、屠宰性能和腸道結構的影響
摘要:應用發酵飼料是減抗替抗的一種有效方法,已經得到了大家的共識。發酵飼料原料,甚至是全價飼料發酵的研究與應用已成為行業發展的大趨勢。發酵飼料是以微生物、復合酶為發酵劑,將飼料原料轉化為微生物菌體蛋白、生物活性小肽類氨基酸、活性益生菌、復合酶制劑為一體的生物飼料。近年來,大量的研究表明發酵飼料可以改善動物生產性能、提高動物機體免疫力、改善腸道微生態平衡。用來生產發酵飼料的常用微生物主要有乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌、霉菌(黑曲霉和米曲霉)、糞鏈球菌等。乳酸菌是應用最早、最廣泛的菌種,兼性需氧或嚴格厭氧條件下生長,能利用碳水化合物進行發酵,主要產生乳酸。應用乳酸菌發酵飼料過程中會產生大量乳酸,可改善飼料的適口性,降低pH,抑制腸道有害菌的生長,從而減少貯藏過程中干物質和營養物質的損失。芽孢桿菌是一種好氧菌,可以將蛋白質降解為小肽,將多糖降解為易吸收的低分子糖,從而提高動物的生長速度和飼料利用率。在長期的實踐中,人們發現發酵過程中有很多重要的生化反應過程僅依靠單一的菌株是不能完成的,必須利用兩種或多種微生物共同作用完成,因此混合菌種發酵逐漸發展起來。近年來,利用混合菌種進行發酵的研究越來越多,并取得了很好的效果。但是由于肉雞腸道相對短,如何在肉雞飼料中科學有效地應用仍需要大量的試驗進行驗證和研究。本試驗選用植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌對肉雞全價飼料進行混菌發酵,并按一定比例添加在肉雞全價飼料中,研究其對肉雞生長性能、免疫功能和腸道發育的影響,為微生物發酵飼料在肉雞飼料中的推廣和應用提供參考。
材料與方法
在配制好的基礎日糧中添加由農業農村部飼料生物技術重點實驗室篩選并保藏的植物乳桿菌(活菌數1.0×109CFU/g)和枯芽孢桿菌(活菌數1.0×109CFU/g),加入30%蒸餾水混合均勻,裝入呼吸袋(PA/PE七層共擠膜,50cm×80cm)常溫(25~35℃)厭氧發酵5d。每個呼吸袋裝入發酵底物15kg。
試驗分2個階段進行,1~21日齡為試驗前期,22~42日齡為試驗后期。采用籠養,1~3日齡光照時間為24h/d,4~7日齡為23h/d,之后為16h/d。乳頭式飲水器供水,自由采食,常規免疫。
于21和42日齡時,雞空腹12h后,以重復為單位進行稱重,記錄采食量,計算1~21、22~42和1~42日齡的平均體重(ABW)、平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。
于42日齡時,每重復隨機選取1只雞,按《家禽生產性能名詞術語和度量統計法》(NY/T 823-2004)測定屠宰率、全凈膛率、半凈膛率、腿肌率、胸肌率和腹脂率。計算公式為:
屠宰率(%)=(屠體重/宰前體重)×100%;
全凈膛率(%)=(全凈膛重/宰前體重)×100%;
半凈膛率(%)=(半凈膛重/宰前體重)×100%;
腹脂率(%)=(腹脂重/(全凈膛重+腹脂重))×100%;
腿肌率(%)=(腿肌重/全凈膛重)×100%;
胸肌率(%)=(胸肌重/全凈膛重)×100%。
42日齡時,每個重復選取體重接近平均體重的1只雞,取回腸、十二指腸和空腸,中段處剪下約1cm的腸段,用生理鹽水洗凈后放入4%甲醛固定液中固定。將固定好的樣品按病理檢驗標準操作程序進行。脫水、修剪、包埋、切片、染色、封片,采用BA200Digital數碼三目攝像顯微攝像系統對切片進行圖像采集,采集40倍圖片測定絨毛長度和隱窩深度,并計算絨毛長度/隱窩深度(V/C)。
數據采用 SPSS 16.0 軟件的單因素方差分析(One-WayANOVA)對發酵飼料的替代水平進行顯著性檢驗,對差異顯著者采用 LSD 多重比較,顯著水平設為0.05。
結果
由表3可知,在生長前期,F10組肉雞平均日采食量和料重比最低,顯著低于F20組(P<0.05),對照組和F10組間差異不顯著(P>0.05)。生長后期,F10組平均日增重最高,料重比與對照組差異不顯著(P>0.05);F20組料重比顯著高于其他兩組(P<0.05)。從全期來看,與對照組相比,F10組肉雞平均日增重有增加的趨勢(P=0.05),料重比顯著低于對照組和F20組(P<0.05)。
由表4可知,添加發酵飼料對肉雞的屠宰性能沒有顯著影響(P>0.05)。
由表5可知,F20組42日齡肉雞的回腸隱窩深度顯著高于對照組和F10組(P<0.05);由表6可知,F10和F20組42日齡肉雞十二指腸絨毛長度顯著高于對照組(P<0.05);由表7可知,F10和F20組42日齡肉雞十二指腸和空腸絨毛長度/隱窩深度顯著高于對照組(P<0.05)。
討論
生長性能是衡量發酵飼料是否有效的最重要的指標。大部分研究結果表明發酵飼料對肉雞生長性能的影響是有正向作用的。舒剛等以枯草芽孢桿菌和保加利亞乳桿菌作為發酵菌種,日糧不制粒,粉料飼喂,添加不同比例的發酵飼料發現,試驗組和藥物組相比,日增重較高,料重比降低。倪玉嬌等將芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌作為發酵菌種,以棉籽粕、芝麻餅、DDGS為底物,常溫20℃發酵96h制得發酵飼料,當發酵飼料用量為15%時,對肉仔雞平均日增重有顯著影響,用量為10%時,節省的飼料成本最多。張偉偉等采用白地霉、熱帶假絲紅酵母和啤酒酵母混菌發酵馬鈴薯渣,馬鈴薯渣發酵飼料能降低肉雞的料重比,提高飼料中蛋白質的利用率。林麗花等指出,在1~4周齡黃羽肉雞日糧中用9%發酵豆粕替代普通豆粕,可提高肉雞平均日增重、降低料重比和死淘率。本試驗添加發酵飼料后制粒,F10組全期的肉雞平均日增重與其他兩組相比有增加的趨勢,料重比顯著下降。原因可能是發酵過程使飼料中復雜的大分子物質如淀粉、纖維素、蛋白質等降解為動物易消化吸收的小分子物質單糖、雙糖、低聚糖和氨基酸,產生微生物菌體蛋白以及微生物代謝產物。20%比例替代組料重比顯著高于10%比例替代組,可能是因為微生物生長會消耗營養物質,添加比例過大會降低飼料的營養濃度,反而使肉雞生長性能下降。
屠宰性能是衡量肉雞肉用性能的主要指標。祁瑞雪使用發酵豆粕替代普通豆粕(發酵豆粕含有地衣芽孢桿菌1.2×107CFU/g,高活性酵母菌1.0×107CFU/g),6%的發酵豆粕替代豆粕可顯著提高肉雞屠宰率、全凈膛率和腿肌率。本試驗各處理組的屠宰性能沒有顯著差異。不同試驗中發酵飼料應用效果的結果不一致可能與發酵菌種、生產工藝、活菌數量及替代劑量、飼料是否滅菌或制粒等有關系。
小腸是肉雞對營養物質進行消化和吸收的主要場所,小腸絨毛發育的情況及其對養分的利用直接影響著機體的生長發育情況。腸道絨毛的長度與絨毛上的細胞數量呈顯著正相關,只有成熟的細胞才具備吸收養分的功能。因此,腸道絨毛長說明成熟細胞多,機體對養分的吸收利用能力則強。隱窩深度反映了隱窩細胞的增殖率和成熟度。絨毛長度/隱窩深度可反映小腸的功能狀況,其值下降表明消化吸收功能下降,Missotten等使用植物乳桿菌發酵飼料飼喂肉雞,發酵飼料組空腸和回腸中段的絨毛長度較對照組分別提高了22.6%和16.0%。Sun等研究指出,發酵過程產生的小肽能夠改善斷奶仔豬腸道黏膜結構,增加營養物質的吸收利用效率。而未經發酵的普通豆粕含較多的大豆蛋白和植物凝集素等抗原物質,這些抗原物質會給肉雞腸道造成損傷,使得腸絨毛上皮細胞的成熟數量減少、成熟速度緩慢,造成動物消化吸收能力減弱,飼料未及時被消化而堆積在腸道內引起內容物發酵、有害菌大量繁殖,有害菌分泌的腸毒素反過來損傷腸道絨毛結構,如此反復循環,阻礙肉雞的生長發育。本試驗中,F20組42日齡肉雞的回腸隱窩深度顯著高于對照組和F10組。F10和F20組42日齡肉雞十二指腸絨毛長度、十二指腸和空腸的絨毛長度/隱窩深度均顯著高于對照組。由此可以推斷發酵飼料有利于絨毛上細胞的生長和成熟,從而使得養分吸收的面積變大,提高營養成分的吸收效率,這與發酵組具有較好的生長性能相對應。
結論
本試驗條件下,發酵飼料以10%的比例替代全價飼料,肉雞全期的平均日增重有增加的趨勢,料重比顯著下降;以20%的比例替代全價飼料,肉雞的回腸隱窩深度顯著增加。發酵飼料以10%和20%的比例替代全價飼料,肉雞的十二指腸絨毛長度、十二指腸和空腸的絨毛長度/隱窩深度顯著高于對照組。
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