桑葉粉混合發(fā)酵飼料對草魚健康性及魚肉風(fēng)味品質(zhì)影響
桑葉蛋白質(zhì)含量高,并具降糖、降脂、消炎抗菌等作用,能提高畜禽水產(chǎn)動物的免疫力,在健康養(yǎng)殖方面具有巨大的發(fā)展?jié)摿ΑQ芯堪l(fā)現(xiàn):桑葉除含有豐富的礦物質(zhì)及維生素外,還含有許多特殊功效的天然活性物質(zhì)成分。干物質(zhì)含甾醇46mg(比綠茶高3~4倍),還含有異槲皮苷200~500mg、槲皮苷30mg、槲皮苦素100mg等能抑制脂質(zhì)氧化作用的黃酮類物質(zhì)。在飼料中添加10%的桑葉不會影響羅非魚的生長性能,同時可有效調(diào)節(jié)羅非魚的脂質(zhì)代謝,改善其肌肉品質(zhì),發(fā)酵桑葉能劑量依賴性地降低高脂血癥羅非魚的血脂、血糖水平,提高機體的抗氧化能力,飼料中添加桑葉和發(fā)酵桑葉對胡須雞有降低血脂含量、增強免疫力、提高抗氧化能力等作用,發(fā)酵桑葉粉替代50%的魚粉時,巴塔野鯪的增重率、特定生長率明顯高于對照組,在草魚飼料中添加5%桑葉粉對其生長性能無顯著影響,當(dāng)桑葉粉含量達到10%時,其生長性能受到抑制。
草魚是中國重要的淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟魚類,產(chǎn)量位居全國淡水養(yǎng)殖之首,在集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中,普遍采用提高飼料脂肪水平以節(jié)約蛋白質(zhì)的策略,以達到促進魚類生長,減少氮磷排放,保護養(yǎng)殖水體環(huán)境的目的。由于草魚攝食量大、對能量的需求低以及對高脂飼料利用能力低,飼料中脂肪水平過高時容易導(dǎo)致魚體脂肪沉積過多、機體抗氧化能力下降,脂質(zhì)過氧化程度加重,甚至導(dǎo)致高脂血癥和營養(yǎng)性脂肪肝的發(fā)生,危害魚類的生長。本研究以草魚幼魚為試驗對象,研究桑葉發(fā)酵飼料對投喂高脂飼料的草魚生長、肌肉營養(yǎng)組成、血液指標(biāo)、肝臟脂肪含量、抗氧化能力的影響,旨在為探索解決高脂飼料導(dǎo)致草魚脂肪沉積增多、抗氧化能力降低及脂質(zhì)代謝紊亂等問題,為草魚的健康養(yǎng)殖提供數(shù)據(jù)參考。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 試驗飼料
桑葉粉(桐鄉(xiāng)青高溫殺青烘干)、進口魚粉、菜籽粕、棉籽粕、豆渣(豆粕)、面粉、維生素和礦物質(zhì)混合料、發(fā)酵劑。
1.1.2 試驗魚苗
從漁場購0.55kg左右大小草魚苗,配0.52kg左右白鰱,整理前魚池內(nèi)鯽魚、鯉魚留大小比較均勻若干尾(共9.10kg)。
1.2 養(yǎng)殖魚塘
實驗魚塘為重慶市蠶業(yè)科學(xué)研究院果桑品種比較試驗園100m2水面魚池。于2017年9月12日清塘,用鮮石灰全池均勻撒布消毒,用鐵絲網(wǎng)將魚池均分為2等分,保證兩邊魚苗(草魚、鯽魚、白鰱等)不能混,只有水可以兩邊流動,兩邊魚池分別放置長、寬1.2m×0.8m的活動飼料臺,便于每日飼料食下情況觀察記錄,魚池準(zhǔn)備完畢關(guān)水15d左右投放魚苗。
1.3 魚苗投放
2017年9月26日,從市場購買0.55kg左右大小的草魚苗50尾、0.52kg左右大小的白鰱12尾及原池中鯽魚(鯉魚)共9.10kg,分別放在鐵絲網(wǎng)分隔的兩邊魚池,2d后開始按比較試驗設(shè)計投放飼料。
1.4 精飼料配制
(1)處理組(CL):桑葉粉混合發(fā)酵飼料,按干物重量比,魚粉4.9%~5.3%、豆渣19.0%~22.0%、豆粕38.0%~42.0%、棉籽粕26.0%~28.0%、維生素與礦物質(zhì)預(yù)混料0.8%~1.2%、桑葉粉3.0%~5.0%、發(fā)酵劑0.2%。
(2)對照組(CK):無桑葉粉發(fā)酵飼料,按干物重量比,魚粉4.9%~5.3%、豆渣19.0%~22.0%、豆粕38.0%~42.0%、棉籽粕26.0%~28.0%、維生素與礦物質(zhì)預(yù)混料0.8%~1.2%、面粉3.0%~5.0%、發(fā)酵劑0.2%。
按食用草魚飼料國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T36205 2018)粗蛋白≥20.0%、粗脂肪≥2.0%、灰分≤13.0%,達到所配混合飼料粗蛋白36.0%~37.5%、粗脂肪3.7%~3.9%、灰分7.0%~10.0%、總能量11.5~12.0MJ/kg。
將上述飼料混合均勻,在25℃~28℃下,發(fā)酵48h干燥備用。
1.5 飼養(yǎng)
對照組(CK)用青草+無桑葉混合發(fā)酵飼料飼養(yǎng),處理組(CL)用青草+桑葉粉混合發(fā)酵飼料,每天早上8:30和下午5:00各投放兩次飼料,每次投放飼料前,將上次投放飼料剩余量進行測量記錄,便于計算食下量。
記錄投放魚苗重量、每日天氣情況、飼料食下量、魚兒生長情況等內(nèi)容。每次投放飼料前,將上次投放飼料全部清除并稱重,計算食下量,再根據(jù)上次食下量,確定下次飼料投放量。
1.6.2 抽樣調(diào)查
將魚塘所有魚全部清塘,并分類稱重,將未受傷草魚按cK和cL兩組分別放在充氧水箱,并在水箱放入適量MS一222麻醉劑進行麻醉減少草魚活動,直接送到實驗室檢測肝臟組成、肉質(zhì)、風(fēng)味物質(zhì)、血清脂質(zhì)、肝臟抗氧化能力等指標(biāo)。
1.7 樣品的制備與分析
將取回樣品,禁食24h后稱重,每個重復(fù)隨機取4尾魚,用MS_222進行麻醉,剝離出內(nèi)臟、肝胰臟,用于肝體指數(shù)(HSI)和肝脂含量的測定;每個重復(fù)另隨機取3尾魚于尾靜脈取血,于4000×g 4℃條件下離心10min,收集血清,-20℃保存?zhèn)溆谩Q笜?biāo)均采用全自動生化分析儀(日立7100)測定,包括血清總膽固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL—C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL—C)含量。血清超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量采用試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))進行測定。蛋白質(zhì)含量采用考馬斯亮藍法測定。
1.8 數(shù)據(jù)處理與分析
部分?jǐn)?shù)據(jù)采用SPSS22.0對所得數(shù)據(jù)進行方差分析,差異較大數(shù)據(jù)直接用平均數(shù)比較。
2 結(jié)果與分析
2.1 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能有效改善草魚肝臟健康
由表1可知,CL組草魚生長速度、尾均重顯著高于對照。同時,CL組草魚肝體比和臟體比較CK組草魚比較,都有所下降,肝體比下降了71.7%,臟體比下降了30.1%,肥滿度cL組低于CK組,草魚體型優(yōu)美、鱗片緊實,形體接近于野生草魚形態(tài),可能與添加桑葉量偏多有一定的關(guān)系,還需要進一步優(yōu)化其添加量。
由表2可知,CK組草魚肝臟顏色偏淡,脂肪附著面積、脂肪厚度顯著高于CL組,CL組魚肝臟水分、肝臟脂肪、腸脂肪含量分別為73.80%、21.30%、8.86%,魚肝臟水分較CK組增加了6.26%;肝臟脂肪、腸脂肪分別較CK組下降了36.73%、54..38%,大幅改善了草魚脂肪肝的狀態(tài),提高了草魚肝臟健康。
2.2 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能提高草魚肝臟抗氧化能力
機體中自由基清除酶主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH—PX)等。SOD可清除機體內(nèi)的超氧自由基,CAT和GSH—PX可清除機體內(nèi)的過氧化氫。丙二醛(MDA)是多不飽和脂肪酸過氧化的主要分解產(chǎn)物,是反映草魚氧化應(yīng)激的重要指標(biāo)。
由表3可知,CL組草魚與CK組草魚比較,肝臟總抗氧化能力(T—AOC)和T—SOD均有明顯增加,MDA明顯降低。飼料中添加發(fā)酵桑葉粉能極顯著提高草魚抗氧化能力,對草魚抗應(yīng)激、耐缺氧能力有較大的作用,從而促進草魚生長。
2.3 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能有效調(diào)節(jié)血清脂肪代謝,促進草魚健康
由表4可知,適量添加發(fā)酵桑葉粉飼養(yǎng)草魚,能有效調(diào)節(jié)其脂質(zhì)代謝,顯著降低草魚血清指標(biāo)中的總膽固醇、甘油三酯、葡萄糖含量(P<0.05),能有效改善高能高脂飼料對草魚生長的不利影響,促進草魚健康。
2.4 桑葉粉混合發(fā)酵飼料能顯著提高肉質(zhì)及草魚風(fēng)味物質(zhì)
由表5和表6可知,CL組與CK組草魚比較,全魚水分、全魚灰分、全魚蛋白含量差異不顯著,但天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、酪氨酸等風(fēng)味氨基酸含量均有顯著的提高,風(fēng)味物質(zhì)肌苷酸含量提高19.78%、苷氨酸提高21.74%,CL組全魚脂肪含量顯著低于CK組,但肌肉脂肪含量差異不顯著,說明桑葉主要是降低內(nèi)臟脂肪,CL組草魚肌肉中的不飽和脂肪酸總量高于CK組108.00%,影響肉質(zhì)的油酸提高190.63%、亞油酸提高144.40%、亞麻酸提高14.29%,顯著提高了草魚的肉質(zhì)和風(fēng)味。
3 討論
研究發(fā)現(xiàn),鮮桑葉中含有一些防御蛋白、植物凝集素和丹寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子,對水產(chǎn)動物消化吸收造成負面影響,另外桑葉表面覆蓋蠟質(zhì)層,單胃動物難以消化利用。本次試驗過程中發(fā)現(xiàn),在用青草飼養(yǎng)草魚時,過多添加鮮桑葉對草魚生長有一定影響,草魚消化不完全,同時草魚排泄物直接造成水面大量綠藻生長,直接污染水質(zhì),對草魚生長有一定影響。飼料中添加75%的發(fā)酵桑葉養(yǎng)殖淡水鯰魚(Heteropneu stesfossilis)不影響其生長和飼料利用,用發(fā)酵桑葉粉替代50%的魚粉飼養(yǎng)巴塔野鱗增重率、特定生長率顯著高于對照組,而且還展現(xiàn)出良好的飼料利用率。本試驗研究發(fā)現(xiàn),將適量桑葉粉與其他飼料成分混合共同發(fā)酵飼養(yǎng)草魚,草魚的健康性和生長率明顯高于對照,且飼養(yǎng)過程中草魚耐缺氧能力明顯提高。因此,在用桑葉養(yǎng)殖草魚最好不用鮮桑葉直接飼養(yǎng)。
SOD主要清除氧自由基,減輕或避免自由基和脂質(zhì)過氧化物對動物機體造成的損傷。而CAT將SOD清除活性氧時產(chǎn)生的過氧化氫(H2O2)轉(zhuǎn)化為水(H2O),保護機體免受損傷,預(yù)防性給予發(fā)酵桑葉能夠增加高脂血癥羅非魚血清SOD和CAT活性以及CAT/SOD,降低血清MDA含量。本試驗結(jié)果也進一步證實這種推斷,即飼料中添加發(fā)酵桑葉能顯著降低試驗草魚血清指標(biāo)中的總膽固醇、甘油三酯、葡萄糖含量(P<0.05),極顯著提高了草魚抗氧化能力,通過提高機體抗氧化能力及抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng),改善脂質(zhì)代謝功能,對改善草魚肝臟健康,提高草魚抗應(yīng)激、耐缺氧能力有較大的作用,從而達到提高草魚健康養(yǎng)殖。用桑葉粉混合發(fā)酵飼料與常規(guī)飼料飼養(yǎng)草魚比較,影響魚肉風(fēng)味物質(zhì)天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、酪氨酸等含量顯著高于對照(P<0.05),全魚脂肪含量顯著低于對照(P<0.05),但肌肉脂肪不顯著,說明桑葉主要是降低內(nèi)臟脂肪,桑葉草魚肌肉中的不飽和脂肪酸總量高于對照組108.00%,影響肉質(zhì)的油酸高于對照190.63%、亞油酸高于對照144.40%、亞麻酸高于對照14.29%,說明桑葉發(fā)酵飼料飼養(yǎng)草魚不僅可以提高草魚養(yǎng)殖健康性,還可以提高草魚肉質(zhì)和風(fēng)味。
4 結(jié)論
適量添加桑葉粉混合發(fā)酵飼料,可以有效改善草魚肝臟健康,提高草魚抗氧化能力、抗體應(yīng)激能力,從而促進草魚健康生長。同時,還可以提高營養(yǎng)價值和風(fēng)味物質(zhì)。
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