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發酵飼料對斷奶仔豬腸道菌群的影響

2021-04-02 10:54:16      點擊:

摘要本試驗旨在研究發酵飼料對斷奶仔豬腸道菌群的影響。將27頭平均體重6.83 kg的28日齡斷奶仔豬隨機分為3個處理,即試驗I組(基礎日糧)、試驗Ⅱ組(基礎日糧+20%的過夜水)、試驗Ⅲ組(基礎日糧+菌液+20%過夜水)。試驗期為15 d。試驗結果表明,Ⅲ組十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結腸中乳酸桿菌的數量顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05);Ⅲ組回腸、結腸中的芽孢桿菌數量顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05),其余各組差異不顯著(P>0.05);Ⅲ組回腸、盲腸和結腸中大腸桿菌數量顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05),其余各組差異不顯著(P>0.05)。發酵飼料可改善斷奶仔豬腸道菌群構成,有助于減少仔豬腹瀉和增強仔豬對營養物質的消化吸收能力。

在抗生素污染問題越來越嚴重的今天,過多藥物的應用造成仔豬腸道菌群平衡紊亂,使一些非致病菌死亡,腸道菌群平衡失調,從而引起長期腹瀉或者缺乏維生素等反應,造成動物體傷害,發酵飼料的應用,是解決抗生素問題的一個有效方案。在飼料中添加有益微生物使其大量繁殖,先進行體外消化,分解飼料中的抗營養物質,當動物采食后,營養物質得到充分吸收,有益微生物又可定殖在腸道中,從而改善仔豬的腸道結構,彌補了早期斷奶帶來的缺點。


1 材料與方法


1.1 試驗材料
1.1.1 發酵用菌液成分

含有乳酸菌、枯草芽孢桿菌,總均數5×1010CFU/g。

1.1.2 試驗動物和日糧配制 

選用28日齡大白×長白二元雜交斷奶仔豬27頭,按體重相近原則隨機分為3個處理,每個處理3個重復,每個重復3頭仔豬。試驗I組為對照組(PD),飼喂基礎日糧;試驗Ⅱ組飼喂基礎日糧+20%過夜水;試驗Ⅲ組為發酵飼料組(ND+P)飼喂基礎日糧+20%過夜水+菌液。預飼期為7d,試驗期為15d。仔豬采用分欄飼養。自由采食和飲水。豬舍溫度保持在28℃左右。


1.2 試驗方法
1.2.1 樣品采集及處理 

試驗結束的最后1d,每個重復隨機挑選1頭體重適中的健康仔豬進行屠宰,剖腹取腸段(分別為十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結腸),兩頭結扎,立即帶回實驗室檢測。于超凈工作臺上稱取1g腸內容物于無菌試管中,加入滅菌生理鹽水9mL,用渦旋振蕩器振蕩30s,此為10-1,依次進行10-3~10-7稀釋。

1.2.2 大腸桿菌的檢測 

用微量取液器分別取十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結腸內容物10-4~10-6 稀釋液0.1mL,涂布接種于麥康凱NO.3培養基平皿上(各稀釋度設3個重復,并編號),置37oC培養箱中有氧培養24h后,選取粉紅色或紅色,表面光滑、凸起,邊緣整齊不透明,質地軟、粘、直徑1.0~3.0mm的菌落進行計數,并進一步作生化鑒定。

1.2.3 乳酸桿菌的檢測 

用微量取液器分別移取十二指腸、空腸、回腸、結腸和盲腸內容物10-5~10-7稀釋液0.1mL,涂布接種于改良MC瓊脂培養基平皿上(各稀釋度設3個重復,并編號),置37oC培養箱中有氧培養48h后,選取乳白色,稍偏黃,表面光滑、凸起,邊緣整齊不透明,質地軟,直徑0.6~2.7mm的菌落進行計數,并進一步作生化鑒定。

1.2.4 枯草芽孢桿菌的檢測 

用微量取液器分別移取十二指腸、空腸、回腸、結腸和盲腸內容物10-5~10-7稀釋液0.1mL,涂布接種于 LB 瓊脂培養基平皿上(各稀釋度設3個重復,并編號),置37℃培養箱中有氧培養24h后,選取乳黃色,正面中間有環形褶皺,表面光滑濕潤,邊緣整齊不透明的菌落進行計數,并進一步作生化鑒定。

1.2.5 仔豬腸道 pH 的測定

另取仔豬各腸段內容物0.5g放入裝有4.5mL滅菌蒸餾水的試管中,在微量振蕩器上震蕩20min,用PHS-3C酸度計進行pH的測定。


1.3 數據處理及分析 

所有數據的統計分析均采用Excel 2003和SPSS 13.0軟件統計分析,用ANOVA進行單因素方差分析,數據以平均數±標準差的形式表示,差異顯著者采用Duncan氏方法進行多重比較。


2 結果與分析 


2.1 發酵飼料對斷奶仔腹瀉率的影響

發酵飼料對斷奶仔豬腹瀉率的影響見表2。由結果可以看出,Ⅲ組比Ⅰ組腹瀉率降低了10.37%(P<0.05),Ⅱ組比Ⅰ組降低6.67%(P<0.05),Ⅲ組比Ⅱ組降低了3.7%(P<0.05)。


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2.2 發酵飼料對斷奶仔豬腸道 pH 的影響 

結果顯示見表3。Ⅲ組中空腸的 pH 比Ⅰ組降低了7.82%(P<0.05),比Ⅱ組降低了9.19%(P<0.05);Ⅲ組中回腸的pH比Ⅱ組降低了5.3%(P<0.05);Ⅲ組中結腸的 pH 比Ⅰ組降低了7.66%(P<0.05);其他腸段及組間pH差異不顯著(P>0.05)。


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2.3 發酵飼料對斷奶仔豬腸道菌群的影響

結果顯示見表4。Ⅲ組十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結腸中乳酸桿菌的數量顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05);Ⅲ組回腸、結腸中的芽孢桿菌數量顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05),其余各組差異不顯著(P>0.05);Ⅲ組回腸、盲腸和結腸中大腸桿菌數量顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05),其余各組差異不顯著(P>0.05)。


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3 討論 


3.1 發酵飼料對斷奶仔豬腹瀉率的影響

引起斷奶仔豬腹瀉的原因如下:飼養環境被大腸桿菌和輪狀病毒污染;輪狀病毒損壞了腸上皮,使營養吸收受阻;斷乳后,仔豬失去了母源抗體的保護;斷奶 應激,造成大腸桿菌和輪狀病毒生長繁殖,使腸上皮損傷進一步惡化;飼糧由液體變為固體,使仔豬食欲減退,輪狀病毒感染就越厲害,導致腹瀉持續時間越久。因此,采取措施來阻止或限制輪狀病毒或大腸桿菌的感染就十分重要。

本試驗可明顯看出,隨著仔豬日齡的增加,飼喂發酵飼料的仔豬抵抗腹瀉的能力顯著高于不飼喂發酵飼料的的仔豬。發酵飼料中的益生菌通過在黏膜表面定植,與其發生相互作用,可以有效刺激免疫反應,把病原菌從腸道上排斥出去。很多研究表明,當有益微生物進入動物體內后,可以影響動物的免疫功能,增強自身免疫力,增加腸道黏膜對外界的抵抗力。


3.2 發酵飼料對斷奶仔豬腸道 pH 的影響

哺乳期間的仔豬能分泌充足的胰脂酶、乳糖酶和蛋白酶。21日齡前胰淀粉酶分泌量較少,所以對淀粉的消化能力很差。盡管乳糖酶在仔豬出生后 0~14 日齡 活性很高,但麥芽糖酶和蔗糖酶分泌量少而且活性很低。斷奶仔豬的酶活性均顯著下降,分解疼痛的能力也大大降低,致使仔豬產生乳酸及分解各種營養物質的能力下降。很多試驗都表明,豬采食含有發酵菌液的飼料后,腸道中的乳酸含量升高,有效的降低胃腸內的 pH 和大腸菌群數量,提高了抗菌能力,同時提高飼料消化率和動物對養分的吸收能力。

在本試驗中,由于發酵飼料中含有乳酸桿菌和枯草芽孢桿菌,枯草芽孢桿菌可與腸道內的有害菌群爭奪氧氣,抑制其生長繁殖,而乳酸桿菌自身也可以產生一些消化酶,如蔗糖酶、乳糖酶和肽酶等,分解食物中的糖分,產生大量的乙酸和乳酸, 使腸內pH和Eh下降,腸道處于酸性環境,對病原菌等有拮抗作用。乳酸能調節腸道pH,以激活胃蛋白酶,促進胃腸蠕動,提高鐵、鈣、磷的利用率,促進維生素 D 和鐵的吸收,幫助食物的消化、吸收,減輕脹氣和促進肝臟功能等。


3.3 發酵飼料對斷奶仔豬腸道菌群的影響 

仔豬腸道微生物區系隨宿主日齡增加形成了一個相對穩定的微生態系統,對宿主的生長起著重要作用。腸道中微生態系優勢種群為厭氧菌占99%以上,而需 氧菌和兼性厭氧菌只占有1%。當畜禽下痢的時候,優勢菌群發生了更替,即專型厭氧菌明顯減少,需氧菌明顯增多,微生態失去平衡。當給腹瀉仔豬口服有益菌制劑后,腸內需氧菌與厭氧菌之間由下痢時的微生態失調逐漸恢復到正常的微生態狀態,即優勢菌群平衡。Canibe等試驗發現,發酵菌液飼料組較不發酵組能明顯降低胃腸道的有害細菌數量,提高了日糧的適口性,增加了采食量。Tran等的研究表明,發酵飼料能有效的增加胃腸道中有機酸的濃度,減少胃中的大腸桿菌的數量,可以改善腸道的菌群,提高動物的生產性能。Canibe等研究發現,添加植物乳酸菌的飼料可以影響胃腸道的微生物,降低胃的酸度和減少大腸桿菌的數量。以上這些實例都說明了發酵飼料的優越性。

在本試驗中,腸道中乳酸桿菌的數量顯著高于其他兩組,說明在腸道原有菌群的基礎上,添加的乳酸菌在腸道定殖大量繁殖,芽孢桿菌的數量也增長的趨勢,大腸桿菌的數量也明顯降低。



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