發酵飼料資源開發及應用技術研究進展
開發及應用技術研究進展
導 語
生物飼料是指使用《飼料原料目錄(2013)》和《飼料添加劑品種目錄(2013)》等國家相關法規允許使用的飼料原料和添加劑,通過發酵工程、酶工程、蛋白質工程和基因工程等生物工程技術開發的飼料產品總稱,包括發酵飼料、酶解飼料、菌酶協同發酵飼料和生物飼料添加劑等。其中,微生物 飼料具有諸多優勢。大力發展微生物發酵飼料產業可以擴大飼料范圍,實現飼料定向轉化,提高飼料利用率, 減少飼用抗生素等添加劑的使用。目前, 歐美等國家和地區微生物發酵飼料的使用比例大于50%;荷蘭、芬蘭規模化豬場應用生物飼料飼喂達到60%;丹麥生物飼料養豬的比例達到80%(陳來華,2015)。當前,我國在生物飼料企業規模、種類、發酵技術和飼料中的應用上與國際領先水平仍有一定的差距。
1 發酵飼料生產工藝和生產設備研究
1.1 發酵飼料的生產工藝
按照微生物發酵采用的培養基狀態, 微生物發酵可以分為固態發酵和液態發酵。固態發酵是指在沒有或幾乎沒有自由水存在的條件下, 在有一定濕度的水不溶性固態基質中, 用一種或多種微生物發酵的一個生物反應過程。固態發酵過程中受物料碳氮比、營養成分、含水量、pH 和發酵溫度等多種因素的影響,因此,發酵參數應根據菌種、工藝及發酵目標而確定(祝玉洪等,2013)。按照微生物對氧的需求固態發酵方式可以分為好氧發酵、厭氧發酵、兩段式發酵三種。其中好氧發酵的發酵速度快、周期短、物料轉化率高,但耗損高;厭氧發酵香味濃厚、呼吸耗損小, 但發酵周期長。固態厭氧發酵有較好的仿生效果,可以利用呼吸膜發酵袋控制發酵氣壓,實現厭氧發酵和產品長期保存, 適合在廣大養殖場推廣。此外,也有研究有效地結合了好氧和厭氧兩種發酵工藝的優點, 采用先好氧后厭氧的兩段式發酵方式(熊鋒等,2016)。楊文宇等(2017)研究了混合菌種兩步發酵法對豆粕肽轉化及品質的影響, 以枯草芽孢桿菌和黑曲霉好氧發酵作為前發酵, 再以釀酒酵母及保加利亞乳酸桿菌厭氧發酵作為后發酵對豆粕進行兩步發酵。結果表明,第一步發酵中肽的轉化率為52.01%, 第二步發酵中肽的轉化率為65.08%,且兩步發酵優于一步發酵。張代等(2017)對7 個不同廠家發酵豆粕產品的理化指標進行了對比分析,結果表明,7 個廠家發酵豆粕產品粗蛋白質含量為49.05% ~50.94%,小肽含量為12.53% ~ 17.18%,KOH 蛋白質溶解度含量為66.02% ~ 90.70%, 總酸含量為3.1%以上,L-乳酸含量為2.5% ~ 3.70%, 而抗原蛋白與寡糖去除情況和氨基酸組成差異較大。這說明不同廠家所采用的生產工藝與發酵菌種不同,發酵豆粕產品理化指標差異較大。
1.2 發酵飼料的生產設備
固態發酵飼料是目前研究的熱點,并且研究層次也在不斷升高,由最初對發酵條件的優化,到現在對品質的追求,推動了發酵飼料向更高層次的發展。由于固態發酵不能像液態發酵一樣實現對發酵過程的嚴格控制,因此發酵過程中產生的一些變化不能人為消除,只能通過發酵參數調節加以控制。比如豆粕在發酵過程中發黏問題。豆粕發黏是發酵過程中豆粕在水和微生物的共同作用下其理化性質發生變化后的必然表現,發酵豆粕的黏度超過臨界值后, 會使得顏色加深,結塊,并且有氨臭味。然而品質優良的發酵豆粕在外觀上要求顏色棕黃,松散不結塊,氣味酸香無氨臭,因此,發酵豆粕過黏也是對品質的一種損壞。李世豪等(2015)通過質構儀研究了發酵過程中發黏的成因及對粉碎的影響。結果表明,發黏的主要原因是小分子蛋白質和小肽的增多,并且隨著發酵時間增長黏度在不斷增大。黏度對豆粕的易粉程度不是線性的,在發酵72h前有利于豆粕的粉碎加工,而72h后的樣品不利于粉碎加工。
要想實現發酵飼料的產業化發展, 大型發酵飼料成套裝備的開發顯得尤為重要。現在固態發酵和干燥設備不同程度地存在自動化程度低、能耗高、產品變性的問題,尤其在黏性發酵飼料的自動轉運、生產效率高且能保持發酵飼料的活性上,仍存在較大困難。針對以上問題,可通過優化發酵塔的通風系統, 研制黏性發酵飼料的粉碎干燥裝備,從而實現在線粉碎、分離與干燥,生產效率高且能保持發酵飼料的活性。
2 發酵飼料資源的開發與應用
2.1 發酵餅粕飼料資源
我國餅粕類資源十分豐富,主要有大豆餅粕、菜籽餅粕、棉籽餅粕、花生粕、芝麻餅粕、油茶餅粕、葵花籽餅粕、亞麻籽餅粕等。這些餅粕原料都富含植物蛋白,但是抗營養因子含量高, 蛋白質和氨基酸消化利用率低,導致雜粕在飼料中的添加量很低(一般低于8%)。采用微生物發酵技術能有效去除餅粕中的抗營養因子,產生豐富的功能活性物質,提高餅粕的飼用價值。
2.1.1 發酵豆粕
2.1.1.1 生產工藝研究
發酵豆粕是目前研究最多也最為深入的一種生物飼料。微生物發酵可以顯著降低豆粕中的抗營養因子, 并且相對于豆粕其常規營養成分也發生了多種有益變化(Ding等,2015)。袁正武等(2015)研究表明,枯草芽孢桿菌、釀酒酵母菌、乳酸菌的添加比例分別為3‰、2‰、1‰,蛋白酶添加量為2‰,菌種活化時間為0.5 h,發酵的初始水分為38%,溫度為30 ~ 42 ℃時,發酵豆粕的理化指標最優,其中小肽含量可達20%以上,乳酸含量可達3.5%以上,并且質量穩定。張艷萍等(2017)選用糞腸球菌、產朊假絲酵母及枯草芽孢桿菌3 種菌株對豆粕進行發酵, 結果發現發酵飼料微生物活性越高, 干物質回收率越低;糞腸球菌發酵活性最高,為32.4億cfu/g,產朊假絲酵母活性最低,僅為5.8億cfu/g;干物質回收率以產朊假絲酵母最高,為94.50%,糞腸球菌最低,為90.02%。酸度的上升幅度以糞腸球菌最大,為1.28%;粗蛋白質提高幅度以產朊假絲酵母最高,為3.95%;枯草芽孢桿菌則以小肽和總氨基酸含量變化最大,分別提高4.35%和12.57%。史玉寧等(2017)采用米曲霉、釀酒酵母混合發酵豆粕,分別研究不同水分、不同菌種接種量對發酵豆粕營養指標的影響。結果表明,在水分45%,米曲霉、釀酒酵母接種量分別為0.5%、4%,同時添加0.1%酶制劑的條件下,發酵豆粕的粗蛋白質含量提高了21.27%、酸溶蛋白含量提高了695.97%。付亭亭等(2014) 研究了不同菌種對豆粕中水蘇糖、棉子糖的發酵降解效果。結果表明,豆粕∶玉米粉∶麩皮以9∶0.5∶0.5 的比例進行混合,按15%的接種量,30 ℃下發酵48 h, 可部分或者完全降解豆粕中的水蘇糖和棉子糖。近年來,利用發酵的微生物分泌β-葡萄糖苷酶作用于大豆異黃酮糖苷,極大程度地提高了糖苷的轉化效率,降低生產成本,實現了苷元異黃酮的直接生產(孫潔心等,2012)。周玲玲等(2017)研究了高活性大豆異黃酮發酵豆粕對斷奶仔豬生長發育、抗氧化功能和肝功能的影響。結果表明,在斷奶仔豬(尤其是斷奶兩周內)日糧中以高活性大豆異黃酮發酵豆粕替代普通豆粕有較好的飼喂效果,替代量為8%最佳。
2.1.1.2 在豬上的應用
Wang 等(2014)采用嗜熱鏈球菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母對豆粕進行發酵制備發酵豆粕, 并替代豆粕用于斷奶豬的喂養, 發現飼料配方中含有6%發酵豆粕可促進斷奶豬的快速生長。Jin 等(2015)研究表明,與豆粕和魚粉相比, 發酵豆粕可以提高斷奶豬的氨基酸和其他營養物質表觀消化率, 有利于豬的生長和發育。熊瑩等(2016)在仔豬基礎飼糧中分別添加5%、10%和15%的發酵豆粕及10%的風干發酵豆粕,結果顯示,發酵豆粕能有效改善保育豬生長性能, 提升仔豬免疫力, 降低腹瀉率, 添加水平以10%為宜。陳玉龍等(2016)給對照組飼喂18%普通豆粕飼糧, 試驗組以5%、10%、15%、24%的發酵豆粕替代飼糧中普通豆粕,結果顯示,與對照組相比, 試驗組對保育豬料重比、腹瀉率影響顯著(P < 0.05),對保育豬血清中尿素氮和血糖含量有顯著影響, 對血清中谷丙轉氨酶和天門冬氨酸轉移酶有極顯著影響(P< 0.01)。林靖等(2016)研究指出,5%發酵豆粕能顯著提高肥育豬生長性能,促進蛋白質的沉積和養分的吸收利用, 減少氮的排出;但10%、15%發酵豆粕替代豆粕對提高肥育豬生長性能和降低糞便中養分排出無顯著影響。目前, 國內外關于發酵豆粕在母豬飼糧中的應用與報道較少。辛小召(2014)報道,添加10% ~ 15%的發酵豆粕能顯著提高斷奶仔豬重和成活率,縮短母豬斷奶至發情間隔, 降低哺乳期間仔豬的腹瀉率, 提高母豬采食量, 促進母豬機體對粗蛋白質、粗脂肪、鈣、磷等營養物質的消化吸收;母豬飼糧中添加發酵豆粕改善了母豬乳汁成分, 增加了乳蛋白、乳糖、乳脂肪的含量,母豬血清中總膽固醇、尿素氮和谷草轉氨酶水平均顯著降低。
2.1.1.3 在家禽上的應用
阿布都如蘇力·艾爾肯等(2014)研究了嗜酸乳桿菌發酵豆粕對肉仔雞生長性能和屠宰性能的影響,結果表明,在肉雞生長全期, 抗生素組和發酵豆粕組較對照組料重比分別下降了6.85%和4.44%(P<0.01),發酵豆粕組料重比較抗生素組顯著提高了2.60% (P<0.05)。與對照組和抗生素組相比,發酵豆粕組的胸肌率分別提高了3.93%(P>0.05) 和5.73%(P< 0.05);腿肌率分別提高了8.76%和10.45%(P<0.01);腹脂率分別下降了16.54%和25.45%(P<0.01)。說明發酵豆粕飼料要優于普通豆粕飼料,并可發揮代替飼用抗生素的作用。
2.1.2 發酵菜籽粕
Hu 等(2016)利用枯草芽孢桿菌、產朊假絲酵母和糞腸球菌進行菜籽粕的固態發酵,有效降低了菜籽粕中粗纖維、硫苷、異硫氰酸酯和植酸水平,肉雞試驗結果表明,發酵菜籽粕可以顯著增強肉雞血清超氧化物歧化酶活性和總抗氧化能力,改善肉雞腸道形態的完整性。邱良偉等(2015)研究了植物乳桿菌和黑曲霉復合微生物固態發酵對菜籽粕脫毒效果及營養價值的影響。結果表明,復合微生物固態發酵可顯著降低菜籽粕中的抗營養因子含量, 混菌發酵效果優于單菌種發酵。發酵后菜籽粕中粗蛋白質含量提高了6.57%,小肽含量提高了88.76%,粗纖維含量降低11.31% ;抗營養因子異硫氰酸酯含量降低了64.00%,噁唑烷硫酮含量降低了81.82%,硫苷含量降低了75.16%,總氨基酸含量提高了11.59%。蔣邊等(2015)以兩種細菌(枯草芽孢桿菌W1-3、枯草芽孢桿菌10160)和三種真菌(畢赤酵母、釀酒酵母和黑曲霉)為出發菌種,進行單菌、混菌固態發酵研究。結果表明,由枯草芽孢桿菌W1-3 發酵所得的菜籽粕中多肽、粗蛋白質、氨基酸含量分別增加453.47%、10.39%、17.76%, 硫苷和植酸兩種抗營養物質含量分別降低62.14%和31.58%。
2.1.3 發酵棉籽粕
棉籽粕中的抗營養因子限制了其在畜禽飼糧中的大量使用, 王曉玲等(2016)通過醋酸棉酚與菌株共培養的方法, 篩選獲得了一株在液體培養條件下棉酚脫除率達90%以上的枯草芽孢桿菌(ST-141)。利用該菌株與釀酒酵母對棉籽粕進行混菌固態發酵,30 ℃發酵48 h后棉籽粕中游離棉酚脫除率達48.5%, 同時粗蛋白質含量增加19%,氨基酸總量上升22.2%,必需氨基酸含量增加28.4%。Wang 等(2017)開展了發酵棉籽粕在肉雞上的應用效果研究,結果表明,0 ~21 日齡時,8%發酵棉籽粕組平均體重較8%棉籽粕組提高3.98%, 平均體重較玉米-豆粕組提高0.83%。日糧中添加8%的發酵棉籽粕可顯著提高血清免疫水平和抗氧化水平, 并且可提高盲腸乳酸菌數量。聶存喜等(2015)研究了酵母菌發酵棉籽粕對黃羽肉雞肌肉主要脂肪酸組成的影響,結果表明, 日糧中添加發酵棉籽粕可顯著增加21 ~42 日齡黃羽肉雞胸肌率和43 ~ 64 日齡腿肌中亞油酸含量,對21 ~ 42 日齡腿肌脂肪酸組成無顯著影響。魏尊(2017)研究了不同添加量的嗜酸乳桿菌發酵棉籽粕對蛋雞生產性能、蛋品質及血液生化指標的影響。結果表明,蛋雞日糧中用發酵棉粕代替豆粕,在不影響蛋品質的情況下,以添加10%的效果最佳。劉長忠等(2015)研究表明,與豆粕組相比,發酵棉仁粕組生長鵝腹瀉率顯著降低,十二指腸內容物和胰臟組織的胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性顯著提高,指出發酵棉仁粕替代玉米-豆粕型基礎日糧30%的豆粕能提高生長鵝生長性能和消化酶活性。
2.2 發酵玉米小麥加工副產物
我國每年有數千萬噸玉米被用于制取淀粉和乙醇, 在玉米深加工過程中會產生大量的玉米粉、玉米皮和玉米胚芽餅粕等副產品(林謙等,2013)。如果僅對大量副產物進行簡單的利用,不僅是對資源的浪費,而且還會對環境造成污染。利用微生物對玉米加工副產物進行生物發酵, 能改善玉米加工副產物的適口性和營養價值。
李加友等(2016)利用單因素比較法確定了產朊假絲酵母JXU2066 在飼料發酵過程中的脫毒控制方法。結果表明,在被黃曲霉毒素污染的玉米中添加適量的麩皮和尿素,以固體基質含量8%的比例接入菌齡為72h的產朊假絲酵母JXU2066,30d 后的發酵飼料中黃曲霉毒素含量由230 μg/kg 降為8.7 μg/kg, 粗蛋白質含量為15.6%,發酵飼料色澤金黃,氣味芳香。王偉偉等(2014)對酵母菌CGMCC2.119 發酵玉米加工副產物的發酵條件進行優化研究,得出最優發酵條件:發酵時間60 h、接種量7.93%和初始pH 為7.42,其發酵產物中酵母菌數達1.90億個/g。典姣姣等(2016)利用黑曲霉、枯草芽孢桿菌、酵母菌和乳酸菌混合發酵噴漿玉米皮生產蛋白質飼料, 通過響應面分析得到適宜發酵條件為初始水分含量75%(質量/質量)、接種量15%(體積/質量)、發酵溫度32 ℃、pH 6.0 和發酵時間72 h。在此條件下,產物中粗蛋白質含量為23.79%(干物質基礎,質量/質量),提高了8.29%。魏炳棟等(2017)研究了發酵玉米蛋白粉對肉仔雞生長性能、腸道微生物數量和抗氧化能力的影響,結果表明,與對照組相比, 飼糧添加5%和10%的發酵玉米蛋白粉能夠顯著提高肉仔雞的平均日采食量和平均日增重(P<0.05),能夠極顯著增加28 和56 日齡肉仔雞盲腸乳酸桿菌的數量(P<0.01),能夠極顯著提高血清抗超氧陰離子自由基和抑制羥自由基能力(P<0.01), 并極顯著降低28 日齡血清丙二醛含量(P<0.01)。由此可見,飼糧中添加發酵玉米蛋白粉能夠有效促進肉仔雞生長, 優化腸道菌群結構,提高抗氧化能力。李愛科等(2015)利用小麥淀粉加工副產物戊聚糖漿、麥麩等經黑曲霉發酵,開發了富含功能性低聚木糖的飼料和添加劑產品,能使液態戊聚糖漿中含量1.6%的難消化戊聚糖轉化成含量2.02 g/L 的功能性低聚木糖。
2.3 發酵非常規飼料資源
非常規飼料原料是指在配方中較少使用, 或對其營養特性和飼用價值了解較少的飼料原料,是區別于常用的糧食、谷物等常規飼料的資源。根據飼料的營養特性,我國的非常規飼料可分為7 大類:農作物秸稈和秕殼、糟渣和廢液類飼料、林業副產物、非常規植物餅粕類、動物性下腳料、糞便再生飼料資源及礦物質飼料。但是,這些非常規飼料營養成分不平衡,適口性差,必需經過處理才能使用或限量使用。朱新強等(2016)開展了固態發酵豆渣、葡萄渣和蘋果渣復合蛋白飼料的研究,發酵飼料pH為6.2,粗蛋白質、酸性洗滌纖維、中性洗滌纖維含量分別為11.25%、28.43%和24.68%, 飼用價值顯著提升。羅文等(2017)開展了固態發酵豆渣和蘋果渣復合蛋白飼料的研究,結果表明釀酒酵母、黑曲霉和里氏木霉的配比為3∶2∶4,在接種量1%、培養48 h、基質含水量70%、發酵溫度30 ℃時,發酵產物中粗蛋白質含量從15.87%提高到19.38%。許翔等(2017)研究表明,飼糧中添加5%和10%發酵小麥制酒精沼渣能提高生長肥育豬的平均日增重和平均日采食量,并可提高部分鮮味氨基酸的含量,進而改善肉的風味。程方等(2015)研究了8株菌種對發酵馬鈴薯渣飼料中粗蛋白質、粗纖維含量及蛋白酶活、纖維素酶活的影響。結果表明,黑曲霉Z9 和啤酒酵母PJ 組合為最佳菌種配伍, 且當菌種比例為1∶1 時,粗蛋白質含量為41.72%,蛋白酶活性為1344.93 U/g, 纖維素酶活性為120.87 U/g,分別比對照組提高了78.69% 、296.74% 和1473.77%;粗纖維含量為8.47%,比對照組降低了31.96%。魏立民等(2016)研究了復合酪酸芽孢桿菌對新鮮木薯渣發酵品質的影響, 發酵底物由70%鮮濕木薯渣、10%米糠、18%麥麩、2%硫酸銨組成,分別接種1、2、3 L/t 菌種,充分混合均勻,然后裝入發酵罐密封,發酵30d。結果表明,復合酪酸芽孢桿菌可以提升木薯渣的發酵香味(P<0.05),顯著提高發酵木薯渣的粗蛋白質、粗脂肪和乳酸的含量(P<0.05),顯著降低pH、發酵木薯渣的干物質、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維和鈣含量(P<0.05)。綜合認為,復合酪酸芽孢桿菌以添加量3 L/t時,發酵木薯渣的粗蛋白質和粗脂肪含量最高。
此外,結合地方特有的非常規飼料資源,許多研究人員利用生物發酵技術開展構樹、桑粉、甜葉菊廢渣、香菇菌糟、靈芝菌糠、藥食同源中草藥渣等生物發酵飼料資源的營養價值評定以及在動物上的應用,這極大減少了資源浪費和環境污染。
3 發酵飼料的發展方向
近年來, 雖然微生物發酵飼料得到了深入研究和大力推廣, 但我國發酵飼料研究和產業化開發利用技術方面仍存在多個制約因素, 未來發酵飼料的主要研究方向有:
(1)建立完善的發酵飼料綜合評價體系,要針對不同需求目標(比如促生長、改善腸道健康、提高胴體品質、減少糞便臭味等),開發有功能性和針對性的高效安全的發酵飼料。
(2)要開展發酵飼料添加方式(干基和濕基)、儲藏品質和水分活度研究。要開展發酵飼料在畜禽上多種應用效果的深入評價, 實現發酵飼料資源的合理化應用。
(3) 要深入開展發酵飼料生產工藝的基礎數據研究,要對比研究不同發酵工藝(好氧、厭氧、組合發酵) 條件下達到最佳發酵效果的穩定化產品的質量指標差異,實現大型成套智能化生產。
(4)完善發酵飼料相關法律法規,加快國標行標制訂,培育出一大批發酵飼料龍頭企業和技術人才,加大企業和科研院所在發酵飼料方面基礎理論研究工作, 使我國發酵飼料行業得到可持續發展,為真正無抗飼料時代奠定堅實的飼料原料基礎。
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