白酒糟酵母培養(yǎng)物對肉仔雞生長性能、血清抗氧化指標(biāo)和腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響
摘要:本試驗(yàn)旨在研究白酒糟酵母培養(yǎng)物(DGYC)對肉仔雞生長性能、血清抗氧化指標(biāo);道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響,以確定肉仔雞飼糧中DGYC的適宜添加水平。選取525只1日齡健康的愛拔益加肉仔雞公雛,隨機(jī)分為5個(gè)組,每組7個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)15只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上分別添加0.25%、0.50%、1.00%和2.00%的DGYC。試驗(yàn)期42d。
結(jié)果表明:
1)與對照組相比,飼糧添加1.00%DGYC提高了肉仔雞生長后期(22~42日齡)平均日增重(0.05≤P<0.10),顯著降低了料重比(P<0.05),且均隨DGYC添加水平提高呈二次曲線變化(P<0.05)。
2)與對照組相比,飼糧添加0.25%DGYC顯著降低了肉仔雞21日齡腹脂率(P<0.05),顯著提高了42日齡腿肌率(P<0.05);飼糧添加0.50%和1.00%DGYC有降低肉仔雞日齡胸肌滴水損失的趨勢(0.05≤P<0.10)。
3)飼糧添加DGYC線性提高了肉仔雞21和42日齡血清谷胱甘肽過氧化物酶( GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和總抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05);飼糧添加DGYC二次性提高了肉仔雞21日齡血清GSH-Px活性以及42日齡血清SOD活性和T-AOC(P<0.05)。與對照組相比,飼糧添加1.00%DGYC顯著提高了肉仔雞日齡血清GSH-Px活性(P<0.05);飼糧添加0.50%、1.00%和2.00%DGYC顯著提高了肉仔雞21日齡血清SOD活性(P<0.05),顯著提高了肉仔雞21和42日齡血清T-AOC(P<0.05)。飼糧添加0.50%和1.00%DGYC顯著提高了肉仔雞42日齡血清SOD活性(P<0.05)。
4)1.00%DGYC添加組肉仔雞21日齡空腸絨毛高度和42日齡絨毛高度/隱窩深度(V/C)顯著高于對照組(P<0.05),且均隨DGYC添加水平提高呈二次性升高(P<0.05)。
5)肉仔雞生長性能、血清抗氧化指標(biāo)和空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)隨DGYC添加水平升高存在二次曲線效應(yīng)。二次曲線擬合結(jié)果表明,DGYC添加水平為0.9%~1.1%時(shí),空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)最佳;添加水平為1.1%~1.2%時(shí),生長性能血清抗氧化能力最佳。由此可見,飼糧添加DGYC能提高肉仔雞血清抗氧化能力,改善空腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu),從而改善生長性能。以肉仔雞生長性能、血清抗氧化指標(biāo)和腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)為判斷指標(biāo),推薦肉仔雞基礎(chǔ)飼糧中DGYC添加水平為0.9%~1.2%。
1 試驗(yàn)材料
試雞自由采食、飲水,24h光照。試驗(yàn)前3d室溫33℃,此后每周降低2℃,直到24℃,并維持在24℃。按照《AA肉仔雞飼養(yǎng)管理指南》防疫和消毒,試驗(yàn)雞舍良好通風(fēng)。試驗(yàn)過程中,每天08:30和14:30分別記錄雞舍溫度和濕度,清掃衛(wèi)生,記錄死淘雞數(shù)。
分別于肉仔雞21和42日齡,以重復(fù)為單位,早晨空腹稱重雞只,計(jì)算平均體重(ABW)和平均日增重(ADG);試驗(yàn)期間以重復(fù)為單位記錄耗量,計(jì)算試驗(yàn)前期(1~21日齡)、后期(22~42日齡)和全期(1~42日齡)的平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
分別于試驗(yàn)第21和42天,每重復(fù)選取1只接近平均體重試雞,記錄活重,頸靜脈放血致死,稱重全凈膛、胸肌、腿肌和腹脂重。并計(jì)算全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。計(jì)算公式如下:
全凈膛率(%)=全凈膛重/宰前體重×100;
胸肌率(%)=兩側(cè)胸肌重/全凈膛重×100;
腿肌率(%)=兩側(cè)腿凈肌肉重/全凈膛重×100;
腹脂率(‰)=腹脂重/(全凈膛重+腹脂重)×1000
試驗(yàn)第42天,每重復(fù)選取1只接近平均體重的試雞,頸靜脈放血致死,剝離右側(cè)胸肌,測定肌肉滴水損失、蒸煮損失、剪切力和pH。測量方法參考文獻(xiàn)。
分別于試驗(yàn)的第21和42天,每組隨機(jī)選取1只接近平均體重的試雞,空腹無菌翅靜脈采血5mL,室溫靜置2h,3000r/min離心10min,分離血清置于-20℃冷凍貯存。血清抗氧化指標(biāo):比色法測定谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和總抗氧化能力(T-AOC),黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法測定丙二醛(MDA)含量。測定所用試劑盒購自南京某工程研究所,按照試劑盒說明操作。
分別于試驗(yàn)的第21和42天,每重復(fù)隨機(jī)選取1只雞,宰殺后取空腸(膽管后麥克爾憩室前的中部)5cm,用Tris緩沖液漂洗,切成5個(gè)相等部分,在10%中性福爾馬林中固定。常規(guī)方法制作石蠟切片,即經(jīng)過組織脫水、透明、包埋、切片、展片、蘇木精-伊紅(HE)染色和封片等程序,光學(xué)顯微鏡下測定絨毛高度和隱窩深度,并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(V/C)。每個(gè)切片隨機(jī)抽取5個(gè)非連續(xù)性視野,每個(gè)視野統(tǒng)計(jì)3組數(shù)據(jù),絨毛長度指絨毛頂端到絨毛基部的長度,隱窩深度是指腸腺底部到2根絨毛之間基部開口處的距離。
采用SPSS 16.0軟件的one-way ANOVA程序進(jìn)行方差分析,采用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較,用Contrast命令檢驗(yàn)DGYC的線性和二次效應(yīng),以P<0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn),0.05≤P<0.10為有差異顯著性趨勢標(biāo)準(zhǔn)。
由表2可知,試驗(yàn)前期(1~21日齡),飼糧添加DGYC對肉仔雞ABW、ADG、ADFI和F/G均無顯著影響(P>0.05)。試驗(yàn)后期(22、42日齡),肉仔雞ADG和F/G隨DGYC添加水平提高呈二次曲線變化(P<0.05),其中,1.00%DGYC添加組肉仔雞ADG較對照組有提高趨勢(0.05≤P<0.10),0.50%和1.00%DGYC添加組F/G顯著低于對照組(P<0.05)。DGYC添加組肉仔雞試驗(yàn)后期ADFI均低于對照組,但差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)全期(1~42日齡),飼糧添加DGYC對肉仔雞ABW、ADG、ADFI和F/G均無顯著影響(P>0.05)。
由表3可知,飼糧添加DGYC未見顯著影響肉仔雞21和42日齡全凈膛率和胸肌率(P>0.05)。與對照組相比,0.25%DGYC添加組肉仔雞21日齡腹脂率顯著降低(P<0.05),且腹脂率隨DGYC添加水平提高呈二次曲線變化(P<0.05),并以0.25%DGYC添加組最低。0.25%DGYC添加組肉仔雞42日齡腿肌率顯著高于對照組(P<0.05)。飼糧添加DGYC也未見顯著影響肉仔雞42日齡胸肌的滴水損失、蒸煮損失、剪切力和pH(P>0.05),飼糧添加1.00%DGYC有降低肉仔雞42日胸肌滴水損失的趨勢(0.05≤P<0.10)。
由表4可知,飼糧添加DGYC普遍改善肉仔雞血清抗氧化狀況。21日齡時(shí),肉仔雞血清GSH-Px活性隨DGYC添加水平提高呈線性和二次提高(P<0.05),其中1.0%DGYC添加組顯著高于對照組(P<0.05);與對照組相比,0.50%、1.00%和 2.00%DGYC添加組肉仔雞血清SOD活性和T-AOC均顯著提高(P<0.05),且均隨DGYC添加水平提高而線性升高(P<0.05)。42日齡時(shí),與對照組相比,1.00% DGYC添加組肉仔雞血清GSH-Px活性有提高的趨勢(0.05≤P<0.10),且隨著DGYC添加水平的提高線性升高(P<0.05);飼糧DGYC添加水平線性和二次提高了肉仔雞血清SOD活性和T-AOC(P<0.05),其中,0.50%和1.00%DGYC添加組肉仔雞血清SOD活性顯著高于對照組(P<0.05);飼糧添加DGYC顯著提高了肉仔雞血清T-AOC (P<0.05)。飼糧添加DGYC對肉仔雞21和42日齡血清MDA含量無顯著影響(P>0.05)。
由表5可知,與對照組相比,飼糧添加1.00%DGYC顯著提高了肉仔雞21日齡空腸絨毛高度(P<0.05),且空腸絨毛高度隨飼糧DGYC添加水平提高呈二次曲線變化(P<0.05)。飼糧添加DGYC對肉仔雞21日齡空腸隱窩深度和V/C影響不顯著(P>0.05)。隨飼糧DGYC添加水平的提高,肉仔雞42日齡空腸隱窩深度和V/C呈線性和二次曲線變化(P<0.05),其中,0.50%和1.00%DGYC添加組肉仔雞42日齡空腸隱窩深度較對照組有降低趨勢(0.05≤P<0.10)、空腸V/C顯著高于對照組(P<0.05)。
由表6可知,對ADG和F/G進(jìn)行二次曲線擬合,以ADG和F/G為判斷依據(jù),肉仔雞飼糧中DGYC的適宜添加水平分別為1.121%和1.206%;對存在二次效應(yīng)的肉仔雞血清抗氧化指標(biāo)擬合二次曲線,以血清GSH-Px(21日齡)、SOD(42日齡)活性和T-AOC(42日齡)為判斷指標(biāo),肉仔雞飼糧中DGYC的適宜添加水平分別為1.148%、1.138%和1.245%;以回腸絨毛高度(21日齡)、隱窩深度(42日齡)和V/C( 42日齡)為判斷指標(biāo),二次曲線擬合結(jié)果表明肉仔雞飼糧中DGYC的適宜添加水平分別為1.118%、0.910%和0.966%。
酵母培養(yǎng)物主要由破碎的酵母細(xì)胞、酵母細(xì)胞代謝物和變性培養(yǎng)基組成,富含粗蛋白質(zhì)、氨基酸、核苷酸、B族維生素、礦物質(zhì)和微量元素等營養(yǎng)素及多肽、寡糖(β-葡聚糖與甘露寡糖)、增味劑、消化酶和未知生長因子等多種益生物質(zhì)。研究表明,酵母培養(yǎng)物可改善動(dòng)物生產(chǎn)性能,在蛋雞飼糧中添加0.4%和0.6%酵母培養(yǎng)物可顯著改善蛋品質(zhì),提高飼料轉(zhuǎn)化率。本研究表明,飼糧添加0.50%和1.00%DGYC顯著提高了肉仔雞生長后期F/G,有提高ADG的趨勢,這與Gao等在肉仔雞上的研究結(jié)果一致。關(guān)于酵母培養(yǎng)物促生長作用的機(jī)理尚無定論,但與其富含的各種營養(yǎng)素和益生成分的作用密不可分。蛋白質(zhì)、葡萄糖、氨基酸和維生素等營養(yǎng)素可保障動(dòng)物自身正常生長;β-葡聚糖、甘露聚糖和小肽等可維持腸黏膜完整性,改善腸道內(nèi)環(huán)境,從而促進(jìn)腸道健康;各種消化酶可促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。此外,多級低溫烘干等特殊工藝使本試驗(yàn)用的DGYC保留了部分活性酵母細(xì)胞,其具有調(diào)節(jié)腸道菌群,增加營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收的功能。但DGYC成分復(fù)雜,含有未知生長因子,不能僅根據(jù)已知營養(yǎng)素成分判定作用機(jī)理,且不同成分之間存在的協(xié)同作用與轉(zhuǎn)化作用有待進(jìn)一步探討。
胴體性能可反映營養(yǎng)物質(zhì)在動(dòng)物不同組織(內(nèi)臟、肌肉、骨骼和表皮等)的沉積情況,關(guān)于酵母培養(yǎng)物對肉禽屠宰性能影響的報(bào)道尚不多見。本試驗(yàn)表明,飼糧添加DGYC提高了肉仔雞腿肌率、不改變胸肌產(chǎn)量,與于素紅等的研究結(jié)果一致。家禽腿肌由紅肌纖維組成,胸肌主要是白肌纖維,猜測DGYC對肌纖維促生長刺激可能存在選擇性。本試驗(yàn)中,DGYC還不同程度地降低了試雞腹脂率,可能與其中的釀酒酵母有關(guān),研究證明,飼糧中添加酵母菌可以減少肉雞和蛋雞體內(nèi)的脂質(zhì)沉積。滴水損失、剪切力和pH是衡量肉品質(zhì)的重要指標(biāo),反映了肌肉的系水力、嫩度和肌糖原酵解速度。有研究報(bào)道,0.8%酵母培養(yǎng)物可有效緩解育肥豬肌苷酸含量的下降,降低背最長肌pH24h;0.1%~0.3%的酵母培養(yǎng)物顯著降低了肉仔雞滴水損失,提高了肌肉系水力除能減少滴水損失外,酵母培養(yǎng)物對降低肌肉剪切力的作用顯著。本試驗(yàn)表明,DGYC對肉仔雞剪切力和pH影響不顯著,0.50%和1.00%DGYC有降低滴水損失的趨勢,可能與酵母細(xì)胞成分能夠提高機(jī)體氧化穩(wěn)定性有關(guān),其能阻止過多自由基的產(chǎn)生,維持細(xì)胞膜的完整性,使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)繼續(xù)發(fā)揮充當(dāng)半透膜屏障的功能,防止水分從肉中滲出,從而降低滴水損失。
GSH-Px、SOD是抗氧化系統(tǒng)中重要的酶系,其活性與機(jī)體清除自由基的能力成正比;MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,其含量可間接反映組織氧化損傷程度;T-AOC代表體內(nèi)酶類和非酶類抗氧化物的總體水平,能全面反映動(dòng)物機(jī)體的抗氧化狀態(tài)。機(jī)體抗氧化能力可通過血液GSH-Px、SOD、MDA和T-AOC等指標(biāo)體現(xiàn)。本試驗(yàn)表明,飼糧添加DGYC顯著提升了肉仔雞血清GSH-Px、SOD和T-AOC的活性,說明DGYC具有抗氧化作用。肖曼報(bào)道,飼糧中添加酵母培養(yǎng)物顯著提高了血清T-AOC,降低血清MDA含量,從而提高機(jī)體抗氧化能力,與本試驗(yàn)結(jié)果相似。針對酵母培養(yǎng)物影響肉雞抗氧化性能的報(bào)道較少,作用機(jī)理也尚不明晰??梢钥隙ǖ氖?,酵母培養(yǎng)物中豐富的維生素C、維生素E、微量元素(鋅和硒等)、谷胱甘肽(GSH)及輔酶Q等還原物質(zhì)具有抗氧化作用。此外,釀酒酵母細(xì)胞壁中的β-葡聚糖和甘露聚糖也可以改善腸黏膜結(jié)構(gòu),促進(jìn)鋅、硒、銅等營養(yǎng)素吸收,從而提高抗氧化性能。本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn),DGYC對肉仔雞血清抗氧化指標(biāo)的影響存在著日齡差異性,21日齡的抗氧化提升效果優(yōu)于42日齡。這可能是由于雛雞的心血管、消化和免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未完善,抗氧化應(yīng)激的能力弱,所以DGYC在前期的作用效果更明顯。
小腸是動(dòng)物最主要的消化吸收場所,其黏膜結(jié)構(gòu)與功能的完整性是動(dòng)物體充分吸收營養(yǎng)物質(zhì)的重要保障。絨毛高度、隱窩深度和V/C則是衡量腸黏膜正常功能的重要指標(biāo)。絨毛增高,腸吸收表面積增大;隱窩變淺,腸上皮細(xì)胞成熟率上升;而V/C增大,則綜合反映腸黏膜結(jié)構(gòu)的完善,這些均能體現(xiàn)腸黏膜吸收功能的增強(qiáng)。馬友彪等研究證實(shí),飼糧中添加1%酵母培養(yǎng)物可提高產(chǎn)蛋雞空腸絨毛高度和V/C本試驗(yàn)結(jié)果顯示,飼糧添加0.25%、0.50%和1.00%的DGYC不同程度地提高了肉仔雞21日齡空腸絨毛高度和42日齡空腸V/C,降低了42日齡空腸隱窩深度,與肖曼和于素紅等在肉仔雞上的研究結(jié)果基本一致,表明DGYC改善了腸黏膜結(jié)構(gòu),這可能是本試驗(yàn)提高ADG、降低F/G,生產(chǎn)性能得到改善的原因。酵母細(xì)胞和酵母細(xì)胞壁能夠促進(jìn)腸道發(fā)育,改善腸道內(nèi)環(huán)境。zhang等報(bào)道,是酵母細(xì)胞壁,而非酵母提取物改善了腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)。β-葡聚糖與甘露聚糖是酵母細(xì)胞壁的主要成分,它們能吸附并破壞腸道內(nèi)的有害菌和病毒等,減少胃腸道黏膜與抗原的結(jié)合,從而保護(hù)黏膜免受損傷。這可能是本試驗(yàn)中DGYC改善腸黏膜結(jié)構(gòu)和機(jī)體抗氧化狀況,提高生長性能的重要原因。
本試驗(yàn)表明,飼糧添加DGYC能提高肉仔雞后期生長性能和血清抗氧化能力,能改善肉仔雞空腸腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)。在相關(guān)指標(biāo)上存在DGYC的二次效應(yīng),二次曲線擬合結(jié)果表明,飼糧DGYC添加水平為1.1%~1.2%時(shí),能獲得最佳生長性能和最高血清抗氧化能力;添加水平為0.9%~1.1%時(shí),肉仔雞空腸腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)最佳。綜上,推薦肉仔雞飼糧中DGYC添加水平為0.9%~1.2%。
①飼糧添加DGYC能提高肉仔雞回腸絨毛高度和V/C,降低隱窩深度,提高肉仔雞平均日增重,降低料重比,且在生長后期更加顯著。
②飼糧添加DGYC能提高肉仔雞血清抗氧化能力,能降低試雞21日齡腹脂率,減少42日齡胸肌滴水損失。
③以生長性能、血清抗氧化指標(biāo)和腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)為綜合評價(jià)指標(biāo),DGYC在肉仔雞飼糧中適宜添加水平為0.9%~1.2%。
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