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棉籽酶解蛋白研究表明可提高棉籽粕的經濟效益和蛋白資

2022-02-13 10:29:07      點擊:

一、棉籽餅粕的營養特征:

(一)棉籽餅粕的定義和特點

棉籽餅(cottonseed cake)又名棉餅,是棉籽經脫絨、脫殼和壓榨取油后的副產品。傳統上棉籽餅按脫殼程度,含殼量低的棉籽餅稱為棉仁餅。

棉籽粕(cottonseed meal)又名棉粕,是棉籽經脫絨、脫殼、仁殼分離后,經預壓浸提或直接溶劑浸提取油后獲得的副產品,或由棉籽餅浸提取油獲得的副產品。棉籽粕按脫殼程度,含殼量低的棉籽粕傳統上稱為棉籽仁粕(棉仁粕)。

棉籽餅粕是一類主要的蛋白質飼料原料,其主要特點是:

1、蛋白含量高且變化大,在38%~50%,氨基酸含量不均衡(與豆粕比),賴氨酸少,精氨酸含量特別高,但棉籽餅粕是飼料中色氨酸、蛋氨酸的優良來源。

2、粗纖維含量隨去殼及脫絨程度而不同,有效能值也隨之變化。

3、含游離棉酚、單寧、環丙烯類脂肪酸等抗營養因子。

4、棉籽餅粕含有豐富的維生素E和B族維生素等。

5、由于品種、產地、加工工藝不同,棉籽粕營養成分變異大。

(二)棉籽餅粕的營養成分含量

棉籽餅粕中粗蛋白質含量是衡量其質量的重要指標,但蛋白質含量依棉籽含絨、含殼量及制油工藝而異,棉籽粕在38%~50%變化,棉籽餅在32%~40%變化。在棉籽不脫殼制油工藝中,棉籽餅粕的粗纖維達20%以上。傳統的棉籽制油為了保證出油率和增加餅粕含量均只部分脫殼,或者脫殼后又將殼返填回餅粕中,因此棉餅、棉粕粗蛋白質在40%以下。近年隨著制油工藝的改進以及飼料工業的強烈要求,棉籽制油脫殼比例越來越大,粗蛋白質超過50%的棉粕產品在我國也已批量生產,因此棉粕的粗蛋白質含量已成為其重要的營養質量指標。

(三)棉籽餅粕中的有毒有害物質

1、棉酚

棉酚(gossypol)按其存在形式可分為游離棉酚(freegossypol,FG)和結合棉酚(bindinggossypol,BG),通常將游離棉酚和結合棉酚的總和叫總棉酚(totalgossypol,TG)。游離棉酚是指分子結構中活性基團(醛基和羥基)未被其他物質“封閉”的棉酚,美國油脂化學家學會(AOCS)明確定義:凡能被70%的丙酮水溶液提取的棉酚及其衍生物統稱為游離棉酚。

FG因有活性醛基和羥基而對動物有毒性作用,可與酶或其他蛋白質結合,破壞其活性成分,降低蛋白質消化率,甚至使動物的組織器官發生病理變化,從而導致動物生長遲緩、中毒及死亡。結合棉酚是游離棉酚和蛋白質、氨基酸、磷脂等物質互相作用形成的結合物,它不具有活性,也難以被動物消化吸收,動物采食后可經糞便排出,對動物機體無毒害作用。但在動物體內條件下,如微生物及酶作用下,部分可能被再水解為游離棉酚。

單胃動物FG中毒癥狀表現為:食欲下降、腹瀉、脫毛、凝血酶蛋白低、血紅蛋白和紅細胞及血漿蛋白減少等;嚴重的會導致心肌損傷、內臟充血和水腫、胸腔腹腔體液滲出、出血至死亡。FG還影響雌性動物的發情周期,影響妊娠及早期胎生。另外FG能引起雄性動物的繁殖障礙。

另據報道,棉酚作為多酚類化合物,通過對蛋白分子及膜基質的結合,以及可能通過自由基機制對膜結構的破壞和對電子傳遞體系的干擾,從多方面干擾細胞的代謝:可以表現抗生育、抗炎、抗腫瘤、抗血管舒張、抗病毒、抗寄生蟲活性,以及多方面毒性。

一般來說,添加到日糧中的棉籽餅粕游離棉酚含量在200mg/kg時無毒,在200~500mg/kg時有輕微的毒性,高于1500mg/kg時,具有強毒性。棉酚在體內代謝比較慢,所以食用棉酚后的毒性是累積性的。

國家飼料衛生標準規定了FG在各種飼料中的安全使用限量:棉籽餅粕≤1200mg/kg,肉用仔雞、生長雞配合飼料≤100mg/kg,產蛋雞配合飼料≤20mg/kg,生長育肥豬配、混合飼料≤60mg/kg;聯合國糧農組織規定,動物日糧中FG<125mg/kg;世界衛生組織建議標準規定FG<400mg/kg(表1)。

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2、環丙烯類脂肪酸

環丙烯類脂肪酸(cyclopropenoid fatty acid,CPFA)主要包括蘋婆酸(sterculic acid)和錦葵酸(malva acid),能使家禽形成“桃紅蛋”“海綿蛋”,影響蛋品質。其原因是CPFA可改變卵黃膜的通透性,使蛋黃pH不斷升高,蛋白pH下降,使蛋黃中的鐵離子透過卵黃膜轉移到蛋清中,與清蛋白結合形成紅色復合物,故稱為“桃紅蛋”。CPFA還可使蛋黃變硬,加熱后形成“海綿蛋”。CPFA主要存在于棉籽油中,當棉籽粕含殘油4%~7%時,CPFA為250~500mg/kg,而含殘油1%的棉籽粕中,CPFA含量僅在70mg/kg以下。因此,當棉籽粕脫油較徹底時則無害。

3、植酸與單寧

我國棉籽粕的植酸含量平均為1.66%,單寧含量為0.3%。植酸又稱肌醇六磷酸,是20世紀70年代以來逐漸引起人們注意的一種抗營養因子,它主要存在于植物的種子中,如大豆、棉籽、油菜籽及其餅粕中。植酸易與動物體內的微量元素Zn2+、Fe2+、Ca2+等金屬離子絡合,形成溶解度很低的絡合物,使這些金屬離子不易為動物機體所吸收。動物食用后,會出現疲勞、厭食、生長機能衰退等缺鋅癥狀。另外,植酸鹽還能與蛋白質、淀粉、脂肪結合,并使內源淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶的活性降低,因此植酸也是棉粕中重要的抗營養因素,單寧則主要降低蛋白質的消化率和利用率。

二、棉籽蛋白研究進展

棉籽蛋白作為一種優良的蛋白資源,在營養方面比谷類蛋白的價值高,能與大豆蛋白相媲美,而且不存在大豆蛋白特殊的豆腥味。氨基酸組成方面,絕大部分必需氨基酸的含量都符合FAO 和WTO 推薦的標準。從棉粕中提取蛋白,對開發棉籽蛋白產品,合理利用棉籽蛋白資源,擴大棉籽蛋白的應用范圍具有十分深遠的意義。

(一)棉籽蛋白的營養價值

組成棉籽蛋白的成分大致分為兩種,一種是球蛋白,另一種是谷蛋白,其中前者占有的比例高達到90%。用超速離心機將棉籽蛋白分離可獲取2S、7S、12S三種球蛋白,其中2S球蛋白所含Met 和Lys 豐富,Lys是人體第一限制性氨基酸,具有促進大腦發育,促進脂肪代謝,并提高中樞神經組織功能的作用。其余兩種球蛋白中Met和Lys 含量都較低。

棉籽蛋白的氨基酸組成合理,并且有相當豐富的必需氨基酸,其中,His這類有助于嬰幼兒發育的氨基酸含量也極其豐富。除此之外,棉籽粕中還含有Mg、P、Fe等多種礦質元素,含量與大豆粕相當,遠遠高于谷物含量。經過實驗發現,棉籽粕中的維E、維B 和葉酸含量高于大豆,是維生素的較好來源。

棉籽蛋白與其余幾種植物蛋白必須氨基酸組成的比對見表2。


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(二)棉籽蛋白的應用現狀

棉籽蛋白屬于優質蛋白,相比與大豆蛋白不存在“脹氣”因子。在我國蛋白飼料資源相對緊缺的條件下,將棉籽蛋白部分或全部代替大豆粕用于飼料行業,對于解決蛋白飼料供不應求,加快我國飼料行業的發展具有重要的意義。棉籽蛋白的應用價值在水產飼料方面得到了充分的體現,國外一些學者經研究得出結論,一半的魚粉蛋白能夠被棉籽蛋白所替代作為虹鱒魚飼料,且使用能量達到30.5%。

在微生物發酵方面,棉籽蛋白也發揮了其自身的作用。高振等人將培養大腸桿菌所用的蛋白胨和玉米漿替換成棉籽蛋白,研究發現發酵周期縮短了并且 L-Phe得率提高了,說明棉籽蛋白可以作為優質的有機氮源,大范圍在發酵領域中發揮作用。

三、棉籽功能性肽的研究進展

植物蛋白具有較大的相對分子質量和緊密的結構,由消化道進入人體后并不能完全地被消化吸收,而蛋白質經水解后其分子空間構象被改變,形成了多肽或小分子氨基酸,吸收率大為提高,而且某些具有活性的多肽片段還同時具有抗氧化、調節人體免疫、降低膽固醇等生理功效。多肽獨有的理化特性和生物學活性是蛋白質所不具備的,因此將蛋白水解成功能性肽是當前人們研究的熱點。

(一)棉籽多肽制備方法的研究

生物功能活性肽的獲取途徑一般可以采用以下三種:

(1)直接從組織中提取;

(2)通過化學方法或DNA 重組技術來合成;

(3)采用酶法對蛋白質進行體外水解產生多肽。以酶解的方法制備多肽,反應條件沒有刺激性,所產生有害產物較少,不破壞氨基酸的營養價值同時也能減少對環境的污染,已經逐步成為最有效且最熱門的水解方式。

(二)棉籽多肽的功能特性及應用

蛋白質在水解過程中的分子量會發生很大的變化,可解離出更多的NH4+、COO-基團,露出分子內部的疏水性殘基,某些功能特性如溶解能力、乳化性能、起泡性能和風味等都發生了相應的變化。除此之外,一些小分子的肽還具備不同的生物活性,因此被廣泛應用于不同行業中。

研究者們發現,蛋白的粘度會伴隨濃度的提高不斷增大,但是分子量較小的多肽即使在濃度高達50%時依舊維持較高的流動能力,這是由于小分子肽類的膨脹性不高,造成粘度降低。棉籽被水解形成多肽后,親水性基團大量暴露導致多肽的吸水性增強,且吸水性能不會隨著溫度或pH 值的變化而發生較大的變化,將棉籽多肽這種較好的保水性和吸濕性能應用到點心類食品中,可以阻止食品的老化并維持其酥松的口感。

隨著多肽的加工性能和生理功能受到越來越大的關注,有必要對功能性棉籽多肽的開發和利用進行更深層次的探究和拓展。

四、結語

我國有著豐富且廉價的棉籽粕資源,年產量達到500~600萬噸,由于棉籽粕含有棉酚、環丙烯類脂肪酸、植酸與單寧等抗營養物質,蛋白消化利用率低(為豆粕的65%左右)等原因,限制了其在飼料中的大規模利用,造成了資源的極大浪費。許多研究表明,蛋白質經過降解成低分子量多肽后,能有效促進動物機體蛋白質合成,使整體蛋白質沉積高于相應氨基酸日糧或完整蛋白質日糧,從而提高蛋白飼料的利用率。同時,蛋白質在降解過程中,還可產生具有抗氧化等多種生理功能的活性肽。目前,國內外學者在棉籽粕脫毒方面做了大量研究工作,已開發出以固態發酵為主的棉籽粕脫毒工藝。

因此,以棉籽粕為原料制備生物活性棉籽肽,對于提高棉籽粕的綜合經濟效益,緩解蛋白資源短缺瓶頸顯得十分必要。棉籽肽的研發拓寬了棉籽粕在飼料中應用范圍,有助于緩解飼料原料匱乏問題,促進畜牧業健康發展。


實戰操作技術——棉菜籽餅脫毒變身優質飼料替代豆粕操作新技術

當前豆粕價格很高有些地方貨源緊缺,而棉菜籽餅(棉籽粕、菜籽粕)價格相對便宜,棉菜籽餅是棉子、油菜籽榨油后剩下的餅狀殘渣,蛋白質含量較高,含有各種氨基酸成分。但由于棉菜籽餅中含有植酸、芥子堿等物質,這些物質含有一定的毒性,還會影響動物的消化吸收,不能大量使用,因此不建議直接飼喂給動物!

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現在通過微生物飼料發酵劑的除毒脫毒技術,可以成功將菜籽餅變為優質添加飼料,直接按照1公斤發酵的棉菜籽餅(發酵前的重量)代替約0.85公斤豆粕進行使用。飼料發酵劑中的有益微生物,在發酵過程中分泌的代謝產物,可將棉菜籽餅中的毒性物質等有效分解。

豆粕、菜粕、棉粕成分對比

1.豆粕是一種高蛋白原料,無需脫毒即可用作飼料。其中蛋白質含量為40%-48%,賴氨酸含量為2.5%-3.0%,色氨酸含量為0.6%-0.7%,蛋氨酸含量為0.5%-0.7%。2020年11月12日報價每噸在3500元左右。

2.菜粕的粗蛋白含量在34%-38%之間,特點是蛋氨酸含量高(僅次于芝麻餅、粕),賴氨酸含量亦高。而精氨酸含量低,是餅、粕飼料中含量最低的。菜籽粕的有效能值偏低(淀粉含量低、菜籽殼難以消化利用)。礦物質中,鈣和磷的含量均高,硒和錳的含量亦高。特別是硒的含量是常用植物飼料中最高的。2020年11月12日報價每噸在2900元左右。

3.棉粕蛋白質含量一般為44.32%,僅次于豆粕的蛋白質含量48%,而高于菜籽粕的蛋白質含量36.04%。精氨酸含量高達3.6%-3.8%,而賴氨酸含量僅有1.3%-l.5%,只有豆粕的一半。2020年11月12日報價每噸在3000元左右。


是否需要脫毒處理

1.豆粕無需經過脫毒即可用作飼料。而且豆粕中富含蛋白質和多種氨基酸,在不需要額外加入動物性蛋白的情況下,僅豆粕中含有的蛋白質和氨基酸足以平衡家禽和豬的食譜,促進它們的營養吸收。只有當其他粕類單位蛋白成本遠低于豆粕時,豆粕才有可能被替代。

2.菜粕菜籽中含有硫葡萄糖苷、芥酸、單寧、皂角苷等不良成分,其中主要是硫葡萄糖苷。硫葡萄糖苷本身無毒,但在一定溫度和水分條件下,經過菜籽本身含有的芥子酶的酶解作用而產生異硫氰酸酯、唑烷硫酮和腈類等有害物質。這些物質可引起甲狀腺腫大,從而造成動物生長速度下降,繁殖力減退。單寧則妨礙蛋白質的消化,降低適口性。而芥酸阻撓脂肪代謝,造成心臟脂肪蓄積及生長受到抑制。。使用前需進行一定的脫毒處理,并且使用時要加以限制,具體喂量應根據菜粕中有害成分含量而定。經過脫毒處理的菜籽粕喂量可以加大,而“雙低”油菜籽生產的菜粕喂量要受限制。同時,應結合菜粕的氨基酸組成特點,適當搭配其它餅粕。

3.棉籽中含有對動物有害的棉酚及環丙烯脂肪酸,尤其是棉酚的危害很大。在制油過程中,由于蒸炒,壓榨等熱作用,大部分棉酚與蛋白質、氨基酸結合而變成結合棉酚,結合棉酚在動物消化道內不被動物吸收,故毒性很小。另一部分棉酚則以游離形式存在于餅、粕及油品中,這部分游離棉酚對動物毒性較大,尤其單胃動物過量攝取或攝取時間較長,可導致生長遲緩、繁殖性能及生產性能下降,甚至導致死亡。幼小動物對棉酚的耐受能力更低。由于棉籽餅、粕中游離棉酚對動物有害,因此,在使用棉餅、粕時,要根據飼喂對象及餅粕中游離棉酚的含量加以限量。反芻家畜在有優質粗料及多汁青料的情況下,棉籽餅、粕的用量不受限制,不會造成中毒。對單胃動物要限制喂量,最好使用經過脫毒處理的棉籽餅粕。同時,使用棉籽餅、粕配制飼糧要注意氨基酸平衡,尤其是棉籽餅、粕的賴氨酸含量低,且利用率差,應注意添加賴氨酸。

發酵操作技術

發酵棉菜籽餅其實也是一個脫毒技術,具體操作如下:

1.仔細檢查棉菜籽餅,剔除棉菜籽餅中嚴重變質發霉的部分,輕度發霉的原料可以忽略,因為微生物發酵能夠脫霉。

2.將棉菜籽餅粉碎并添加適量的玉米粉淀粉類的能量飼料等,調節飼料營養比例。

3.每噸棉菜籽餅加入2公斤食鹽、玉米粉(其它淀粉、面粉次粉等也可以,或者粉碎的生紅薯300公斤也可以)100公斤、“99多功能飼料發酵劑”1包(500g/包,市場售價約25元,以高濃度乳酸菌、酵母菌、復合酶制劑的專業發酵劑)。

4.在混合物料中添加適量水分,使混合物料含水量保持在55%左右,以“手抓一把并緊握,無水滴落,松手后輕觸即散”為宜,一般上述配方中需要加入清水約500-600公斤。

5.發酵方式根據實際環境條件各異,在桶、缸、塑料袋等容器中發酵均可。

6.發酵時要盡可能排盡空氣進行密封發酵。如果使用的發酵容器有密封不嚴實的隱患,要在一開始就在其外層包裹一層塑料袋并扎緊。發酵過程中不能啟封。

7.發酵時間受環境溫度影響,通常夏季發酵2-3天,冬季發酵5-7天即可完成。發酵完成后,有較為強烈的酸香味,ph值在3-4。

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規模運用混合發酵現場

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塑料缸、飼料袋(有內膜)均可做發酵飼料

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采用池子發酵

發酵完成的棉菜粕飼喂動物技術

需要注意的是,發酵后的飼料酸度較低,不可以取代禽畜全部日糧。其他類發酵飼料同理。飼喂時根據不同情況,將發酵飼料按照一定比例添加到日糧中,發酵完成的棉菜粕為濕料,具體使用量每大概1.5-2公斤發酵棉菜粕(濕料)代替動物日糧配方中1公斤豆粕的使用量進行代替使用,與其它飼料混合后直接飼喂,由于棉菜籽粕蛋白較高,最高使用量不要超過禽畜日糧飼喂量的40%(濕料重量)。如果發現發酵飼料過酸適口性變差,可在飼喂前在陽光下曬1-2小時,或添加適量的碳酸氫鈉(小蘇打)即可改善。

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發酵過程中與發酵后使用過程中,發酵的容器要一直保持密封狀態,可以長時間保存(一年左右)。

當前養殖業成本高居不下,而飼料成本是其中最高的,利用廉價原料發酵飼料(包括一些輕度發霉的粕類低價收回)是極佳解決辦法。通過微生物飼料發酵劑的發酵作用,可以將輕度霉變飼料變成優質飼料,將不易消化的物質分解為可被畜禽吸收的小分子糖類、氨基酸等。同時發酵飼料中富含有益微生物、酶制劑、酸化劑等,可調節畜禽腸胃微生態環境并進一步提高飼料利用率。發酵飼料氣味清香,提高了飼料的適口性,加上發酵飼料中有大約4℃的酒度,能夠促進動物新陳代謝促進健康抵御疾病,是當前養殖業發展中重要的一環。

本技術也可以同樣發酵菜籽粕(餅)、棕櫚粕等,方法同上。

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