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1.1 FML 的制備

FML 由路德生物環保技術( 古藺) 有限公司提供。其生產工藝如下:以茅臺酒糟為培養基，接種高活性酵母菌種，采用三段式純固態發酵工藝制備FML。第1 階段優化培養條件促進酵母菌增殖;第2 階段在厭氧條件下保證酵母的充分代謝，分泌代謝產物;第3 階段在高溫高濕的條件下促使酵母細胞破壁自溶水解。經測定，FML 中以干物質( 含量為92.97%) 為基礎的養分水平如下:粗灰分9.28%、粗蛋白質23.96%、粗脂肪5.39%、粗纖維17.67%、酸性洗滌纖維38.0%、中性洗滌纖維47.28%、鈣0.53%、磷0.55%和總能18.29 MJ /kg。

1.2 試驗動物分組與飼養管理

動物試驗在中國科學院亞熱帶農業生態研究所永安動物試驗基地開展。試驗選取平均體重為(39.95±2.15) kg 的健康杜×長×大三元雜交去勢公豬48 頭，根據體重隨機分為4 組，每組12 個重復，每個重復1 頭豬，飼養于HHIS－02 型全自動飼喂系統(河南某公司) 中。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組用FML 分別替代5%、10%和15%的基礎飼糧。基礎飼糧的營養標準符合NＲC(2012) 推薦量，其組成及營養水平見表1。試驗過程中，全自動飼喂系統實時記錄每頭試豬的日采食量和日增重等數據。飼喂、飲水、采光和免疫等飼養管理按養殖場規范操作。

1.3 樣品采集與處理

分別于試豬平均體重達60、75 和110 kg 時，每組隨機選取8 頭試豬，清晨空腹稱重，前腔靜脈采血10 mL，肝素抗凝，3 000 r /min 離心10 min，分離血漿，分裝于1.5 mL EP 管中，－20 ℃保存，用于血漿生化參數和抗氧化指標的測定。

1.4 血漿生化參數和抗氧化指標測定

血漿樣品于4 ℃解凍后，按試劑盒( Beckman公司) 說明，采用CX4 型全自動生化分析儀( 美國Beckman 公司) 測定血漿中總蛋白( TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮( UN)、葡萄糖( GLU)、甘油三酯(TG)、總膽固醇( CHO)、高密度脂蛋白－膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白－膽固醇( LDL-C) 含量以及乳酸脫氫酶( LDH)、α－淀粉酶( α-AMY)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST) 和丙氨酸氨基轉移酶(ALT) 活性。按照試劑盒( 南京建成生物工程研究所) 說明，檢測血漿中過氧化氫酶( CAT)、超氧化物歧化酶( SOD ) 和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px ) 活性以及谷胱甘肽( GSH) 和丙二醛(MDA) 的含量。

1.5 數據統計與分析

試驗數據以“平均值±標準誤”表示，數據用Excel 2010 初步整理后，利用SPSS 22.0 進行單因素方差分析( one-way ANOVA) ，并用Duncan 氏法對各組數據平均值進行多重比較。P＜0.05 表示差異顯著，0.05≤P＜0.10 表示有變化趨勢。

2.1 FML 對育肥豬血漿生化參數的影響

由表2 可知，在體重60 kg 時，與對照組相比，5%替代組血漿LDL-C 含量和α-AMY 活性顯著升高( P ＜ 0.05) ，血漿ALT 活性顯著降低( P ＜0.05) ; 10% 替代組血漿α-AMY 活性顯著升高(P＜0.05) ，血漿GLU 含量和ALT 活性顯著降低(P＜ 0.05) ，血漿HDL-C 含量呈降低趨勢( P =0.059) ;15%替代組血漿TG 含量顯著增加( P ＜0.05)。與5% 替代組相比，10% 替代組血漿LDL-C含量顯著降低(P＜0.05) ，血漿CHO 含量呈降低趨勢(P = 0.056) ;15%替代組血漿LDL-C 含量呈降低趨勢(P = 0.066) ，血漿α-AMY 活性顯著降低(P＜0.05)。與10%替代組相比，15%替代組血漿GLU 含量顯著增加( P＜0.05) ，血漿α-AMY活性顯著降低(P＜0.05)。在體重75 kg 時，與對照組相比，5%替代組血漿LDL-C 含量顯著增加( P ＜ 0.05) ，血漿HDL-C含量顯著降低(P＜0.05) ;10%替代組血漿LDL-C含量顯著增加( P＜0.05) ，血漿AST 和LDH 活性顯著降低( P ＜ 0.05 ) ; 15% 替代組血漿UN、HDL-C、GLU 含量以及α-AMY、AST 和LDH 活性顯著降低( P＜ 0.05) ，血漿ALB 含量呈增加趨勢(P = 0.077)。與5%替代組相比，10%替代組血漿UN 含量呈降低趨勢( P = 0.064) ，血漿AST 和LDH 活性顯著降低( P ＜ 0.05) ;15%替代組血漿UN、LDL-C 含量以及α-AMY、AST 和LDH 活性顯著降低(P ＜ 0.05) ，血漿CHO 含量呈降低趨勢(P = 0.052)。與10%替代組相比，15%替代組血漿UN 和CHO 含量和α-AMY 活性顯著降低( P＜0.05)。

在體重110 kg 時，與對照組相比，5%替代組血漿UN 含量顯著降低(P＜0.05) ，血漿α-AMY 活性顯著升高( P ＜ 0.05) ，血漿ALT 活性顯著降低(P＜0.05) ;10%替代組血漿UN 含量和ALT 活性均顯著降低(P＜0.05) ，血漿AST 活性呈降低趨勢(P = 0.054) ，血漿TP 含量顯著增加( P ＜ 0.05) ;15%替代組血漿UN 含量以及AST 和ALT 活性顯著降低(P＜0.05) ，血漿TP 和ALB 含量顯著增加(P＜0.05)。與5%替代組相比，10%替代組血漿UN 含量和α-AMY 活性顯著降低(P＜0.05) ，血漿TG 含量呈降低趨勢(P = 0.057) ;15%替代組血漿UN 含量和α-AMY 活性顯著降低(P＜0.05) ，血漿GLU(P = 0.083) 含量以及AST(P = 0.080) 和ALT(P = 0.094) 活性呈降低趨勢，血漿TP 和ALB 含量顯著增加(P＜0.05)。與10%替代組相比，15%替代組血漿ALB 含量呈增加趨勢(P = 0.091)。

2.2 FML 對育肥豬血漿抗氧化指標的影響

由表3 可知，在體重60 kg 時，與對照組和5%替代組相比，15%替代組血漿GSH-Px 活性顯著升高( P ＜ 0.05 ) ，血漿MDA 含量顯著降低( P ＜0.05) ;15%替代組血漿GSH 含量顯著高于對照組(P＜0.05)。在體重75 kg 時，與對照組相比，各替代組血漿CAT 活性均顯著升高(P＜0.05) ;與對照組和5%替代組相比，10%替代組和15%替代組血漿GSH-Px 活性顯著升高( P＜ 0.05) ，15%替代組血漿SOD 活性顯著高于對照組( P＜0.05)。在體重110 kg 時，與對照組相比，15% 替代組血漿MDA 含量呈降低趨勢(P = 0.092)。

血漿TG、CHO、HDL-C 和LDL-C 含量是衡量機體脂質代謝強弱的主要指標。血漿TG 含量降低提示脂肪沉積能力減弱;血漿CHO 含量可反映機體對脂類的吸收代謝能力;LDL-C 將肝臟合成的CHO 轉運到肝外組織，而HDL-C 則把CHO 運回肝臟代謝轉化為其他物質，從而維持機體內CHO 含量的穩定。本試驗中，用FML 部分替代基礎飼糧尤其是15%替代可顯著增加60 kg 育肥豬血漿TG 含量，5%替代可顯著增加60 kg 育肥豬血漿LDL-C 含量;5%和15%替代均可顯著降低75 kg 育肥豬血漿HDL-C 含量，5%和10%替代均可顯著增加75 kg 育肥豬血漿LDL-C 含量; 與10%替代相比，15%替代顯著降低了75 kg 育肥豬血漿CHO 含量。這提示FML 可改變育肥豬體脂代謝，且作用效果與添加量和添加階段有關。但上述血漿脂質代謝相關指標的改變對動物機體是不利的，肌肉中上述脂質代謝相關指標如何發生變化尚需要進一步研究。

血漿GLU 含量以及α-AMY 和LDH 活性是反映機體糖代謝的相關指標。血漿GLU 含量受胰島素和胰高血糖素的調節，與動物采食量、機體營養狀況和應激水平也呈強相關。血漿α-AMY活性是反映機體消化吸收狀況的一個重要指標，提高血漿α-AMY 活性可提高機體的消化吸收能力和抗病力。LDH 是與組織能量代謝密切相關的酶，動物采食量降低、腸道或肌肉供能不足、細胞萎縮或凋亡，均可引起血漿LDH 活性的升高。本試驗中，用FML 替代10%和15%基礎飼糧分別顯著降低了60 和75 kg 育肥豬血漿GLU 含量;5%和10%替代基礎飼糧顯著提高了60 kg 育肥豬血漿α-AMY 活性，15%替代顯著降低了75 kg 育肥豬血漿α-AMY 活性，5%替代顯著提高了110 kg 育肥豬血漿α-AMY 活性。此外，與5%替代相比，10%和15%替代顯著降低了110 kg育肥豬血漿α-AMY 活性;10%和15%替代顯著降低了75 kg 育肥豬血漿LDH 活性。這提示飼糧添加FML 能提高育肥豬的消化吸收能力，促進機體的能量代謝。這可能是FML 中含有的各種活性成分促進了育肥豬腸道益生菌的增殖，進而改善了飼糧中的能量利用效率。而筆者前期研究用FML 替代部分基礎飼糧并不影響育肥豬的生長性能，且添加5%的FML 可顯著增加平均日增重，顯著降低料重比( 數據未發表)。

AST 主要存在肝細胞胞漿和線粒體中，其活性的高低直接與肝細胞或線粒體的損傷程度相關。ALT 是機體內重要的轉氨酶，在氨基酸代謝以及蛋白質、脂肪和糖的代謝轉化過程中發揮著重要作用。本試驗中，用FML 部分替代基礎飼糧尤其是15%替代顯著降低了75 和110 kg 育肥豬血漿AST 活性，10%替代顯著降低了75 kg 育肥豬血漿AST 活性;5%和10%替代顯著降低了60 和100 kg 育肥豬血漿ALT 活性，15%替代顯著降低了75 和100 kg 育肥豬血漿ALT 活性，這與前述FML 可增加機體蛋白質合成和改善機體能量代謝這一結果相符。這提示FML 替代部分基礎飼糧可對育肥豬肝功能產生有利影響，且其作用效果與替代量有關，這可能與發酵酒糟中含有的多種功能性多肽和未知生長因子有關。

動物機體中存在的清除氧自由基的酶系統主要包括SOD、GSH-Px 和CAT，其活性高低反映了機體抗氧化能力的強弱;GSH 可清除自由基、去除氫和脂質過氧化物，防止生物分子的氧化;MDA 是自由基作用于脂質發生過氧化反應的終產物，其含量增加與自由基生成異?；驒C體抗氧化能力降低有關，因此其含量高低能直接反映細胞膜被氧化的程度。本試驗中，用FML 替代15%基礎飼糧可顯著提高75 kg 育肥豬血漿CAT、SOD 和GSH-Px 活性，顯著提高60 kg 育肥豬血漿GSH-Px 活性和GSH 含量，并顯著降低60 kg 育肥豬血漿MDA 含量，表明FML 可增強機體抗氧化功能并減少氧化損傷。這可能與其中含有GSH、維生素B₂、維生素C、維生素E、硒和鋅等多種生物活性物質有關。肌肉中的脂質氧化會影響肉品質，增強育肥豬機體抗氧化能力有助于減少肌肉中的脂質氧化和細胞膜的損傷，這可能是飼糧添加FML 改善肉品質的機制之一。